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抗原修復(fù)
在組織染色標(biāo)本的制備過程中,抗原可被固定液修飾。抗原經(jīng)常在其游離的氨基基團(tuán)被修飾,由于游離的氨基基團(tuán)常是細(xì)胞結(jié)構(gòu)的主要部分,因而常被其他分子所掩蓋。此外,固定方法可使蛋白抗原高度變性。
抗原修復(fù)法試圖克服上述改變。通過修飾可以打破局部障礙,以便抗體進(jìn)入,并且使蛋白抗原修復(fù)。通常使用的方法包括用限制性蛋白酶處理,或在微波爐或加壓蒸煮器中加熱處理。方法的正確選擇將隨著抗原和抗體的不同而各異。因此,可通過預(yù)試驗(yàn)選擇合適的方法。
抗原修復(fù)的作用機(jī)制尚不清楚,可能與交聯(lián)的減少和鈣離子螯合有關(guān)。懸于EDTA緩沖液中在微波爐或加壓蒸煮器中加熱的方法似乎zui為有效。應(yīng)盡可能地避免直接采用抗原修復(fù)方法,因?yàn)檫@些方法可能引起人為的假陽性染色。
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