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DH82(犬巨噬細胞)規格

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所  在  地上海市

更新時間:2021-04-02 09:23:30瀏覽次數:475次

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DH82(犬巨噬細胞)規格在冷凍保存之前,應觀察細胞生長是否良好 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %冷凍前檢測細胞是否保有其*性質,例如是否有雜細胞或者支原體等。

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產品名稱

英文名稱

規格

DH82(犬巨噬細胞)規格

DH82 (canine macrophages)

5×106cells

產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
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細胞培養技巧:
一、凍存時的注意事項:
1. 在冷凍保存之前,應觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %
2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質,例如是否有雜細胞或者支原體等。
3. 使用的DMSO 應為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應為試劑級等級,以高壓蒸汽
滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。
4. 冷凍保存的細胞濃度:
4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml
4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。
4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。
4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。
5. 冷凍保護劑濃度為5 %或10 % DMSO,若是不確定細胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應作一個backup culture,以防止冷凍失敗。 
凍存的步驟:
1. 冷凍前一日前更換半量或全量培養基,觀察細胞生長情形。
2. 使用ScienCell凍存液 混合均勻,置于室溫下待用。
3. 依細胞傳代培養的操作,收集培養好的細胞,取少量細胞懸浮液(約0.1 ml) 計數細胞濃度及凍前存活率。
4. 離心,去除上清液,加入適量冷凍保存溶液,使細胞濃度為1-5 x 10^6 cells/ml,混合均勻,
分裝于已標示*之冷凍保存管中,1 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。
5. 冷凍保存方法1: 冷凍管置于4 度10 分鐘→ -20 度 30 分鐘→ -80 度16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 長期儲存。
6. 冷凍保存方法2: 冷凍管置于已設定程序之等速降溫機中,再放入液氮槽中。程序為: program 7: HB CELL 。
培養操作步驟
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片); 
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時; 
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中; 
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
辛弗林 質量規格:>98%,BR Synephrine 糖培養基/Lactose Medium250克國產/進口

異鉤藤堿 訂購|咨詢 規格: HPLC≥98%,20mg/支 人淀粉樣蛋白ΒA4(APP)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠山梨脫酶(SDH)ELISA試劑盒,英文名:SDH ELISA Kit

無水檸檬 規格: HPLC≥98%;100mg 訂購|咨詢 人小表皮粘蛋白(SBEM)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠性β葡萄糖苷酶(GBA)ELISA試劑盒,英文名:GBA ELISA Kit

氟他胺 質量規格:>98%,USP29 Flutamide 小鼠平滑肌細胞*培養基100mL

倍他米松(標準品) 質量規格:HPLC>98% ,標準品 Betamethasone NRK(大鼠腎細胞)5×106cells/瓶×2

菊苣 訂購|咨詢 規格: 20mg 小鼠甘丙肽多肽(Galanin peptides)ELISA試劑盒人96T7.8-500 pg/mL小鼠激活蛋白C(APC)ELISA試劑盒,英文名:APC ELISA Kit

芝麻素  英文名稱:Sesamin   保存:-20℃   規格:HPLC≥98% 20mg/支 脫膽固還原酶14抗體

二酰基大花旋覆花內 訂購|咨詢 規格: HPLC≥98%;10mg 7號染色體開放閱讀框27抗體 FⅦ ELISA Kit 凝血因子Ⅶ(FⅦ)ELISA試劑盒

DL-乳(USP) 質量規格:88~92%,USP DL-Lactic acid 16HBE(人支氣管上皮樣細胞)5×106cells/瓶×2

茶明 訂購|咨詢 規格: 100mg ELISA Kit for Human Retinol-binding protein 1大鼠腫瘤壞死因子β(TNFβ)ELISA試劑盒,英文名:TNFβ ELISA Kit

單啡酰酒石  英文名稱:Caftaric acid   保存:-20℃   規格:HPLC≥98% 5mg/支 精氨結合蛋白2抗體

鴨腳樹葉堿(標準品) 質量規格:含量測定 2α,5α-Epoxy-1,2-dihydroakuammilan-17-oic acid methyl ester 人前列腺成纖維細胞*培養基鏈孢囊菌 Streptosporangium sp.

乳依沙吖  英文名稱:Ethacridine lactate   保存:-20℃   規格:100mg 絡絲蛋白抗體

DH82(犬巨噬細胞)規格KRCC1  含賴氨酸卷曲螺旋蛋白1抗體 規格: 0.2ml

CCR6/CD196  細胞表面趨化因子受體6抗體 規格: 0.1ml

ITFG3/C16orf9  整聯蛋白重復蛋白3抗體 規格: 0.2ml

phospho-Histone H1.4(Ser27)  磷酸化組蛋白H1,4樣蛋白抗體 規格: 0.1ml

RYBP/APAP1/CD337  凋亡相關蛋白1抗體 0.2mlCRMP2/DPYSL2  二嘧啶酶相關蛋白2抗體 規格: 0.1ml

Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816)  磷酸化酪氨酸激酶A抗體 規格: 0.1mlphospho-AKT1/2/3 (Tyr315/316/312)   磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗體 規格: 0.1ml

C10orf140  10號染色體開放閱讀框140抗體 規格: 0.2mlDNase II  脫氧核糖核酸酶2抗體 規格: 0.2ml

Fbxw7/CDC4  Fbxw7蛋白抗體 規格: 0.2mlGSTO1  谷胱甘肽硫轉移酶ω1抗體 規格: 0.1ml

phospho-P53(Ser20)  磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規格: 0.1mlIGF2BP2/IMP2  胰島素樣生因子ⅡmRNA結合蛋白2抗體 規格: 0.2ml

RASSF4  Ras相關區域家族蛋白4抗體 規格: 0.2mlRNF185  環指蛋白185抗體 規格: 0.2ml

HDHD1  HDHD1蛋白抗體 規格: 0.2mlCXCR3/CD183  細胞表面趨化因子受體3抗體 規格: 0.1ml

Goat Anti-human IgM/Gold  膠體金標記的羊抗人IgM 規格: 1mlCD54/ICAM-1  細胞間粘附分子-1抗體 規格: 0.1ml

HMG14/HMGN1  高遷移率核小體結合蛋白1 規格: 0.1mlGoat Anti-human IgM/AP  堿性磷酸酶(AP)標記的羊抗人IgM 規格: 0.1ml

MAP-9  微管相關蛋白9抗體 規格: 0.2mlATXN7L3B  共濟失調7樣蛋白3B抗體 規格: 0.2ml

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