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操作流程:
1. .His 標簽蛋白蛋白酶抑制劑10mL規格根據要保存的各樣本的體積,計算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應當是組織體積的10倍(如100mg組織約用1ml RNAwait);離心收集2×106細胞RNAwait的用量是1ml。
2. 將RNAwait按需要量分裝入自備保存管中;
3. 快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm的任意片狀,立即*浸入RNAwait中。組織的厚度一定要<0.5 cm。組織過厚則RNAwait不能有效滲入,組織中間部位的RNA不能受到保護。較小的組織(如大鼠的腎臟、脾臟,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存時先將樣本浸入RNAwait后置4℃冰箱過夜(4℃過夜是必需的,這樣可使RNAwait*滲入到組織中),然后轉移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃時仍為液態,有結晶析出,是正常情況);或者在4℃冰箱過夜后,從RNAwait中取出組織塊,轉移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的標本,反復凍融至室溫20次不影響RNA的質量。
產品特點:
1.His 標簽蛋白蛋白酶抑制劑10mL規格操作簡單,將組織剪薄浸沒在RNAWAIT中即可使其RNA不被降解。
2.替代液氮,使樣品的保存不需液氮,干冰或-80℃冰箱,尤其適用于臨床和野外樣品的快速和大規模采集。
完整,因RNAwait能迅速抑制組織中RNA酶的活性,故從中提取的RNA的質量跟液氮保存的樣品相比不相上下。
4.方便運輸,處理過的樣品能在25℃保存一周,使樣品郵寄和運輸變得容易和便宜,有利學術合作和交流。
5.反復凍融,經RNAwait處理的樣品可反復凍融20次,其間可對樣品進行各種處理而不影響終提取的RNA的質量。
6.結果準確,RNAwait進入細胞十分快速,基因表達在發生應急改變前就得以鎖定,故RNA分析更能反映取樣時的真況。
7.可比性強,RNAwait能減少大規模樣品處理中的誤差,增加各次實驗數據間的可比性,對大規模基因表達譜的分析尤其有用。
8.兼容性廣,處理過的樣品可以使用TRIzol等試劑提取其RNA,樣品還可直接用于組織切片,免疫學和流式細胞分析而不影響RNA的質量。
技術指標
37℃一天(保存三天的樣品RNA有部分降解)
18-25℃一周(保存兩周的樣品RNA有輕微降解)
2-8℃一個月
-20℃和-80℃長期
.His 標簽蛋白蛋白酶抑制劑10mL規格詳細介紹:
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使用方法:
一:用.His 標簽蛋白蛋白酶抑制劑10mL規格新鮮組織樣品
1. 估計*浸沒樣品所需要本產品的體積(1g組織需10mL)。
2. 標記收集管并加入估計所需量的本產品。
3. 以zui快速度將樣品剪切成厚度小于0.5cm的碎塊。
注: 鼠肝、腎和脾等小器官樣品和沒有蠟質保護層的植物樣品可不需剪切而直接放入本產品中保存,有蠟質保護層的植物樣品需要先將蠟表皮破壞。
4. 將組織碎塊*浸沒于收集管的本產品中。
5. 將收集管存放于溫度適當的地方,存放時間不能超過該溫度下的zui長存放時間,如果要存放在-20℃或-80℃,需先將樣品在 4℃放置過夜后再轉移到zui后的溫度。注:將樣品轉移到-20℃或-80℃前,需要倒棄保護液。常見存放溫度與其zui長存放時間關系為如下:
6. 從存放處取出樣品 (-20℃或-80℃保存的樣品需先在室溫下融化),用消過毒的鑷子將組織碎塊從保護液中取出。
7. 立即開始RNA 提取或進行其他處理 (如將樣品分割成更小的碎塊再重新保存等)。注:樣品可以反復凍融二十次而其 RNA 質量不會受到影響。
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* UCP1 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB 50 µg
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