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貨號 | BJ-01X7368 |
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產品參數:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 產品貨號 |
SOCE抑制劑 | SKF-96365 hydrochloride | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg | BJ-01X7368 |
商品詳細介紹:
SKF-96365是SOCE的抑制劑,能夠在結直腸癌細胞里通過引起細胞周期阻滯和凋亡,表現抗腫瘤活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! :130495-35-1 純度:99.73% 分子量:402.91 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
培養操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
Minute of Mice(MVM)小鼠微小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 負20度 一年 2-4周large S protein 人乙肝毒pre S1/S2蛋白抗體 規格: 0.1mlCDK5 周期素依賴性激5抗體 規格: 0.1ml
杏仁源性成分LAMP試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周MLK2/MAP3K10 絲裂原活化蛋白激3K10抗體 規格: 0.2mlNucleolin/C23 核仁蛋白C23抗體 規格: 0.2ml
Enteric Virus-72(EV-72)腸道病毒72型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周AMBRA1 自噬相關基因AMBRA1抗體 規格: 0.2mlAPS APS抗體 規格: 0.1ml
Pseudomonas solanacearum青枯假單胞桿PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周GRP 促胃泌素釋放肽抗體 規格: 0.2mlAPH1a 早老素γ分泌抗體 規格: 0.2ml
Semen oroxyli木蝴蝶PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周IQCG IQCG蛋白抗體 規格: 0.2mlSOSSC/C9orf80 單鏈DNA結合蛋白相互作用蛋白1 規格: 0.2ml
Porcine Cytomegalovirus (PCMV,同豬皰疹病毒2型)豬巨 病毒LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-PRKCA(Ser657+Tyr658) 磷酸化蛋白激C抗體 規格: 0.1mlPhospho-PAK4(Ser99) 磷酸化p21激活激4抗體 規格: 0.1ml
Streptococcus salivarius 唾液鏈球探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周PDZD7 PDZ結構域PDZK7蛋白抗體 規格: 0.2mlCIDE A DNA斷裂因子相似蛋白A抗體 規格: 0.2ml
Rhizoma imperatae白茅根探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周phospho-PTK2(Tyr576+Tyr577) 磷酸化粘著斑激抗體 規格: 0.1mlGlycerol kinase 甘油激抗體 規格: 0.2ml
Actinobacillus actinomycetemcomitans伴放線放線桿LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周ATG1/ULK1 自噬相關蛋白1抗體 規格: 0.2mlPRR11 富含脯蛋白11抗體 規格: 0.2ml
Human Papillomavirus 52(HPV-52)人瘤病毒52 探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周TSHR 促甲狀素受體抗體 規格: 0.1mlMAGEA10 黑色素瘤相關抗原10抗體 規格: 0.2ml
SOCE抑制劑Wnt/beta-catenin和PPAR信號通路抑制劑(FH535)
2OG oxygenase抑制劑(IOX1)
Lck/Src抑制劑(WH-4-023)
EGFR抑制劑(AG 18)
硫氧還蛋白-1(Trx-1)抑制劑(PX-12)
VEGFR1/2/3抑制劑(Tivozanib)
EGFR抑制劑(Canertinib dihydrochloride)
PI3K和mTOR雙重激酶抑制劑(BEZ235 Tosylate)
芳香烴受體(AhR)激動劑(ITE)
HDAC6抑制劑(ACY-738)
MMP/TACE和ADAM抑制劑(TAPI-2)
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