詳細介紹
產品描述:
細胞名稱 人胚胎,皮膚,肌肉;M-22
形態特性成纖維細胞樣
生長特性貼壁生長
特征特性
培養條件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優質胎牛血清,10%
傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況PN5
凍存條件*培養基+8%DMSO
支原體檢測陰性
STR
同工酶
染色體
冷凍保存細胞之方法:
人胚胎,皮膚,肌肉;M-22冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)人胚胎,皮膚,肌肉;M-22準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
sP-Selectin*豬可溶性P選擇素規格48T/96T
ATR*豬抗凝血酶受體規格48T/96T
MIP-1α/CCL3*豬巨噬細胞炎性蛋白1α規格48T/96T
KGF*豬角化細胞生長因子規格48T/96T
TIMP-1*豬基質金屬蛋白酶抑制因子1規格48T/96T
MMP-9*豬基質金屬蛋白酶9規格48T/96T
MMSAM*豬黑色素瘤轉移表面黏附分子規格48T/96T
OT/BGP*豬骨鈣素/骨谷氨酸蛋白規格48T/96T
T*豬睪酮規格48T/96T
MHB*豬高鐵血紅蛋白規格48T/96T
人胚胎,皮膚,肌肉;M-22AEG-1peptideAEG-1抗原AEG-1peptideAEG-1抗原0.5mgAEG-1peptideAEG-1抗原
Ag-ARC(ARG3.1/ARC,Activity-regulatedcytoskeleton-associatedprotein)ARC(多肽抗原)0.5mgAg-ARC(ARG3.1/ARC,Activity-regulatedcytoskeleton-associatedprotein
AGER(Advancedglycosylationendproduct-specificreceptor)晚期糖基化終末產物特異性受體(抗原)0.5mgAGER(Advancedglycosylationendproduct-specificreceptor
AGEs晚期糖基化終末產物AGEsAGEs晚期糖基化終末產物AGEs50mgAGEs晚期糖基化終末產物AGEs
晚期糖基化終末產物蛋白對照品AGEscontrolarticle(advancedglycosylationendproductscontrolarticle)晚期糖基化終末產物蛋白對照品50mgAGEscontrolarticle(advancedglycosylationendproductscontrolarticle
Aggrecan軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原Aggrecan軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原0.5mgAggrecan軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原
Agrinpeptide聚集蛋白抗原Agrinpeptide聚集蛋白抗原0.5mgAgrinpeptide聚集蛋白抗原
血管組織血管緊張素Ⅱ1型受體抗原Agtr1/AT1a(AngiotensinIIreceptor,type1a)血管組織血管緊張素Ⅱ1型受體抗原0.5mgAgtr1/AT1a(AngiotensinIIreceptor,type1a
注意事項:
?1.一般客戶拿到人胚胎,皮膚,肌肉;M-22后,應該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些?
(1)客戶造成細胞污染,不重發;
(2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發;
(3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發;
(4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發;
(5)細胞培養時經其它處理的,不重發;
(6)細胞收到2天內,未告知,不重發;
(7)視具體情況而定。