人胚胎眼鞏膜成纖維細胞；HFSF說明書公司提供的ATCC細胞，*，質(zhì)量保證、我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品描述：
細胞名稱 人胚胎膀胱組織來源細胞；CCC-HB-2說明書
形態(tài)特性上皮樣

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）人胚胎眼鞏膜成纖維細胞；HFSF說明書準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
產(chǎn)品描述：
細胞名稱 人胚胎眼鞏膜成纖維細胞；HFSF說明書
形態(tài)特性成纖維細胞樣

生長特性貼壁生長

特征特性北京眼科研究所建系。

培養(yǎng)條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

傳代方法1:2~1:3傳代；3~4天1次。

傳代情況P5

凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測培養(yǎng)法（-）

STRAmelogenin：X，Y；CSF1PO：10，12；D13S317：10，11；D16S539：9，13；D18S51：17，18；D19S433：13，14；D21S11：31，32.2；D2S1338：18，19；D3S1358：15；D5S818：10，12；D7S820：11；D8S1179：10，16；FGA：18，22；TH01：7，10；TPOX：8；vWA：14；

同工酶

染色體

注意事項：
?1.一般客戶拿到人胚胎眼鞏膜成纖維細胞；HFSF說明書后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。
sLR*小鼠可溶性瘦素受體規(guī)格48T/96T

sRANKL*小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基規(guī)格48T/96T

B7-2/sCD86*小鼠可溶性白細胞分化抗原86規(guī)格48T/96T

sCD40L*小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體規(guī)格48T/96T

sCD30L*小鼠可溶性白細胞分化抗原30配體規(guī)格48T/96T

sCD30*小鼠可溶性白細胞分化抗原30規(guī)格48T/96T

sP-selectin*小鼠可溶性P選擇素規(guī)格48T/96T

sE-selectin*小鼠可溶性E選擇素規(guī)格48T/96T

ENG/sCD105*小鼠可溶性Endoglin規(guī)格48T/96T

Gzms-B*小鼠顆粒酶B規(guī)格48T/96T
人胚胎眼鞏膜成纖維細胞；HFSF說明書C型鈉尿肽抗原CNP/CNPase(2',3'-cyclic-nucleotide3'-phosphodiesterase)C型鈉尿肽抗原0.5mgCNP/CNPase(2',3'-cyclic-nucleotide3'-phosphodiesterase

睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子抗原CNTF(CiliaryNeurotrophicFactor)睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子抗原0.5mgCNTF(CiliaryNeurotrophicFactor

I型膠原蛋白CollagenI(Anti-CollagenTypeI)I型膠原蛋白0.5mgCollagenI(Anti-CollagenTypeI

CollagenIII(Anti-CollagenTypeIII)抗Ⅲ型膠原抗原(CollagenⅢⅢ型膠原)0.5mgCollagenIII(Anti-CollagenTypeIII

CollagenIII(Anti--CollagenTypeIII)Ⅲ型膠原抗原(CollagenⅢⅢ型膠原)0.5mgCollagenIII(Anti--CollagenTypeIII

CollagenIVIV型膠原(CollagenⅣⅣ型膠原)0.5mgCollagenIVIV型膠原(CollagenⅣⅣ型膠原

CollagenV(Anti--CollagenTypeV)Ⅴ型膠原(多肽)0.5mgCollagenV(Anti--CollagenTypeV

COMP軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗原COMP軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗原0.5mgCOMP軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗原
冷凍保存細胞之方法：
人胚胎眼鞏膜成纖維細胞；HFSF說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

 

 

 

 

 

生長特性貼壁生長

特征特性取材自引產(chǎn)的11周男性胚胎組織，由中國醫(yī)學科學院基礎(chǔ)醫(yī)學研究所細胞資源中心建立。

培養(yǎng)條件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)20%FBS

傳代方法1:3傳代；3~4天1次。

傳代情況P5

凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測培養(yǎng)法（-）

STRAmelogenin：X，Y；CSF1PO：10，12；D13S317：9，11；D16S539：11，13；D18S51：12，13；D19S433：13，14；D21S11：29；D2S1338：17，23；D3S1358：16；D5S818：9，11；D7S820：10，12；D8S1179：10，13；FGA：21，25；TH01：7，9；TPOX：8，11；vWA：14，16；

同工酶

染色體

冷凍保存細胞之方法：
人胚胎膀胱組織來源細胞；CCC-HB-2說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）人胚胎膀胱組織來源細胞；CCC-HB-2說明書準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
BDNF*小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子規(guī)格48T/96T

BNP*小鼠腦鈉素/腦鈉尿肽規(guī)格48T/96T

NGB*小鼠腦紅蛋白規(guī)格48T/96T

BGP/Gehrelin*小鼠腦腸肽規(guī)格48T/96T

visfatin*小鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素規(guī)格48T/96T

vaspin*小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑規(guī)格48T/96T

EL*小鼠內(nèi)皮脂肪酶規(guī)格48T/96T

ES*小鼠內(nèi)皮抑素規(guī)格48T/96T

eNOS-3*小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3規(guī)格48T/96T

eNOS*小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶規(guī)格48T/96T
人胚胎膀胱組織來源細胞；CCC-HB-2說明書ChRM2(MuscarinicAcetylcholinereceptorM2)毒蕈堿型乙酰膽堿受體M2（抗原）0.5mgChRM2(MuscarinicAcetylcholinereceptorM2

ChRM2(MuscarinicAcetylcholinereceptorM2)毒蕈堿型乙酰膽堿受體（抗原）0.5mgChRM2(MuscarinicAcetylcholinereceptorM2

ChRM3peptide毒蕈堿型乙酰膽堿受體M3抗原ChRM3peptide毒蕈堿型乙酰膽堿受體M3抗原0.5mgChRM3peptide毒蕈堿型乙酰膽堿受體M3抗原

CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholinereceptoralpha7)煙堿型乙酰膽堿受體α7(多肽)0.5mgCHRNA7(Nicotinic-Acetylcholinereceptoralpha7

CIDEBpeptideCIDEB抗原CIDEBpeptideCIDEB抗原0.5mgCIDEBpeptideCIDEB抗原

C-jun/AP-1(OncoproteinC-jun：activeprotein1)原癌基因蛋白（活化蛋白1）（抗原）0.5mgC-jun/AP-1(OncoproteinC-jun：activeprotein1

peptide細胞角蛋白1/8/19抗原CK1/8/19(Cytokeratin1/8/19;Keratin1/8/19)peptide細胞角蛋白1/8/19抗原0.5mgCK1/8/19(Cytokeratin1/8/19;Keratin1/8/19

CK14/17/42/10peptide細胞角蛋白14抗原CK14/17/42/10peptide細胞角蛋白14抗原0.5mgCK14/17/42/10peptide細胞角蛋白14抗原
注意事項：
?1.一般客戶拿到人胚胎膀胱組織來源細胞；CCC-HB-2說明書后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細胞狀態(tài)不好，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。