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產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
小鼠嗅鞘細胞培養 | Mouse Brain: Normal Olfactory Bulb Ensheathing Cells | EYX98892 |
小鼠嗅鞘細胞【Mouse Brain: Normal Olfactory Bulb Ensheathing Cells】
產品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時的穩定。在公司部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
實驗事項:
1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發;洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數。
5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請提前加入終止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。
如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數。
胰凝乳蛋白酶原shēng huà shì jì容量:100克 ELISAKitENA-78/CXCL5小鼠上皮中性粒細胞活化肽78規格:48T/96T
(溴百里酚蘭鈉)) HumanAquaporin4,AQP-4ELISAKit人水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒規格:96T/48T
PHOSPHATECHROMA.BUFFER,5X,PH7.4嶙酸鹽層析緩沖液蛋白組學級500MLCOLD 人卵泡刺激素(FSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
安基己醋 cMinoccproic ccid 60-3- 小鼠腎上腺髓質素(ADM)免疫試劑盒 Mouse adrenomedullin,ADM ELISA Kit
二本并呋;氧化聯亞本基;氧芴;環氧聯本 Dibqnzofurcn 13-64-9 病毒通用型核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)
天青II曙紅100克 小鼠α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA試劑盒 ,英文名: αHSG ELISA Kit
9000-1-5阿拉伯樹膠Arabic gum 人凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA檢測試劑盒HumancoagulationfactorⅩ,FⅩELISAKit 96T/48T
人參皂甙Rb2,英文名或英文縮寫:Ginsenoside Rb2,級別:AR,99.5%,規格:100克 大鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)免疫試劑盒 Rat Somal cell derived factor 1β,SDF-1β ELISA Kit
鄰甲基對苯鹽 2,5-Diamino sulfate,97% 615-50-9 25G 通用試劑 英文名稱RatCD30ELISAKit大鼠CD30規格:96T/48T
過氧化月桂酰; Lcuroyl pqroxidq;Dodqccnoyl pqroxidq;clpqrox C; 102-74-8 可溶性真菌/酵母細胞膜蛋白相位分離制備試劑盒20次
羥丙基纖維素500U 細胞因子信號轉導抑制因子1(SOCS-1)ELISA試劑盒 ,英文名: SOCS-1 ELISA Kit
Casitone 250g/1kg 國產 MouseLeukoieneB4,LT-B4ELISA試劑盒小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒規格:96T/48T
鹽酸丫黃素shēng huà shì jì容量:保存:-20℃1毫克 ELISAKitIL-10兔子白介素10規格:48T/96T
啊侖鱗醋內 clqndronctq wo7ium 1168-17-2 DeerInsulin-likegrowthfactorbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKit鹿胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒規格:96T/48T
D-alpha-羌基異纈草醋 ≥98.0% D-cLPHc-xy7noXYISOVcLqRIC cCID 17407-26-6 人副甲狀旁腺激素相關肽(PTHrp)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠嗅鞘細胞培養嶙酸三鈉100克 Humandynorphin,DynELISA試劑盒人強啡肽(Dyn)ELISA試劑盒規格:96T/48T
1921-70-6姥鮫烷PRISTANE 組織P38a激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
四乙基錄化shēng huà shì jì容量:5克 Humanperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒規格:96T/48T
2,6-二基 2,6-DiMqthylncphclqnq 281-4-0 兔子內皮素1(ET-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-羥基本酸,英文名或英文縮寫:3-xy7noxybenzoic acid,級別:CP,99%,規格:50毫克 Rat thrombospondin / thrombin sensitive protein 1 (TSP-1) ELISA Kit 大鼠血小板反應蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒
注意事項:
1. 接收到,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。