詳細介紹
產(chǎn)品描述:
細胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0904價格
形態(tài)特性淋巴母細胞樣
生長特性懸浮生長
特征特性該細胞系來源于一無精癥男性患者的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件RPMI1640(w/oHepes)15%NBS
傳代方法1:2傳代;5-6天一次
傳代情況P2
凍存條件基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測熒光法(-)
STR-
同工酶
染色體
冷凍保存細胞之方法:
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0904價格冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0904價格準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
S-100*小鼠S100蛋白規(guī)格48T/96T
P-Selectin/CD62P*小鼠P選擇素規(guī)格48T/96T
p53*小鼠p53規(guī)格48T/96T
小鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸*小鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸規(guī)格48T/96T
NAG*小鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶規(guī)格48T/96T
NT-proBNP*小鼠N端前腦鈉素規(guī)格48T/96T
NT-proBNP*小鼠N端前腦鈉素規(guī)格48T/96T
PAL*小鼠L苯丙氨酸解氨酶規(guī)格48T/96T
Flt3L*小鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體規(guī)格48T/96T
Flt3*小鼠FMS樣酪氨酸激酶3規(guī)格48T/96T
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0904價格重組生長分化因子8/肌肉抑制素GDF8/MSTN(growthdifferntiationfactor8)重組生長分化因子8/肌肉抑制素0.1mgGDF8/MSTN(growthdifferntiationfactor8
生長分化因子8抗原GDF8/MSTN(growthdifferntiationfactor8)生長分化因子8抗原0.5mgGDF8/MSTN(growthdifferntiationfactor8
膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗原GDNF(Glialcellline-derivedneurotrphicfactor)膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗原0.5mgGDNF(Glialcellline-derivedneurotrphicfactor
Gelsolin凝溶膠蛋白抗原Gelsolin凝溶膠蛋白抗原0.5mgGelsolin凝溶膠蛋白抗原
Gentamicin/BSA慶大霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白Gentamicin/BSA慶大霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白2mgGentamicin/BSA慶大霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白
Gentamicin/FITC熒光素標(biāo)記慶大霉素Gentamicin/FITC熒光素標(biāo)記慶大霉素1mlGentamicin/FITC熒光素標(biāo)記慶大霉素
Gentamicin/OVA慶大霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白Gentamicin/OVA慶大霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白2mgGentamicin/OVA慶大霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白
GFAP(GlialFibrillaryAcidicProtein)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(抗原)0.5mgGFAP(GlialFibrillaryAcidicProtein
注意事項:
?1.一般客戶拿到EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0904價格后,應(yīng)該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(6)細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。