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產品描述:
細胞名稱 人結直腸腺癌細胞;NCI-H716 [H716]培養
形態特性上皮細胞
生長特性貼壁生長
特征特性從一位經5-氟尿嘧啶治療的患者腹水中得到的細胞建立了這個細胞株。與其它結直腸癌細胞系不同,這株細胞有多巴脫羧酶,細胞質中有核心致密的內分泌型顆粒。這株細胞不表達TAG-72或CA19-9抗原,也不生成癌胚抗原(CEA)。
培養條件RPMI1640(w/oHepes)優質胎牛血清,10%
傳代方法消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況PN5
凍存條件*培養基+8%DMSO
支原體檢測陰性
STR
同工酶
染色體
冷凍保存細胞之方法:
人結直腸腺癌細胞;NCI-H716 [H716]培養冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)人結直腸腺癌細胞;NCI-H716 [H716]培養準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
*Anti-HRG-Beta/FITC熒光素標記抗HRGβ抗體IgG規格:0.2ml
*Anti-HSL/FITC熒光素標記荷爾蒙敏感脂肪酸抗體IgG規格:0.2ml
*Anti-Phospho-HSL(Ser552)/FITC熒光素標記磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體IgG規格:0.2ml
*Anti-Phospho-HSL(Ser563)/FITC熒光素標記磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體IgG規格:0.2ml
*Anti-Phospho-HSL(Ser565)/FITC熒光素標記磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體IgG規格:0.2ml
*Anti-Phospho-HSL(Ser660)/FITC熒光素標記磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體IgG規格:0.2ml
*Anti-HSP-20/FITC熒光素標記熱休克蛋白-20抗體IgG規格:0.2ml
*Anti-HSP22/FITC熒光素標記熱休克蛋白-22抗體IgG規格:0.2ml
*Anti-HSP-27/FITC熒光素標記HSP-27蛋白抗體IgG規格:0.2ml
*Anti-HSP-47/FITC熒光素標記熱休克蛋白-47蛋白抗體IgG規格:0.2ml
人結直腸腺癌細胞;NCI-H716 [H716]培養*Anti-BrdU/FITC熒光素標記溴脫氧尿苷抗體IgG規格:0.2ml
*Anti-SMARCA4/SNF2beta/FITC熒光素標記抑癌基因SNF2β抗體IgG規格:0.2ml
*Anti-BRMS-1/FITC熒光素標記癌轉移抑制基因1抗體IgG規格:0.2ml
*Anti-BTG2/TIS21/FITC熒光素標記B細胞遷移基因2抗體IgG規格:0.2ml
*Anti-Brucella/FITC熒光素標記抗布魯氏菌抗體IgG規格:0.2ml
*Anti-Brucella/HRP辣根過氧化物酶標記抗布魯氏菌抗體IgG規格:0.2ml
*Anti-Brucella/Biotin生物素標記抗布魯氏菌抗體IgG規格:0.2ml
*Anti-BSEP/FITC熒光素標記膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗體IgG規格:0.2ml
*Anti-BSP/FITC熒光素標記骨涎蛋白抗體IgG規格:0.2ml
*GoatAnti-humanC3/FITC熒光素標記羊抗人補體C3IgG規格:0.2ml
注意事項:
?1.一般客戶拿到人結直腸腺癌細胞;NCI-H716 [H716]培養后,應該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養液吸出,留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些?
(1)客戶造成細胞污染,不重發;
(2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發;
(3)非推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發;
(4)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發;
(5)細胞培養時經其它處理的,不重發;
(6)細胞收到2天內,未告知,不重發;
(7)視具體情況而定。