詳細介紹
大鼠胎兒真皮成纖維細胞【Rat Embryo: Normal Fetal Dermal Fibroblasts】
產(chǎn)品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的大鼠源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時的穩(wěn)定。在公司部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
大鼠胎兒真皮成纖維細胞培養(yǎng) | Rat Embryo: Normal Fetal Dermal Fibroblasts | EYX98984 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,產(chǎn)品名稱貨期短,價格優(yōu),售后齊全。
細胞培養(yǎng)方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
實驗事項:
1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結(jié)合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進行下步操作,任何時侯都應(yīng)避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數(shù)。
5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復(fù)使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準確性。
如標本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。
注意事項:
1. 接收到,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
亞利桑那菌瓊脂shēng huà shì jì容量:RT1米 MousePlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISA試劑盒小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(環(huán)已胺)-1-丙磺酸) ChickenC-ReactiveProtein,CRPELISA試劑盒雞C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
IPTG(NAO)IPTG, 非動物源高純級1 g367-93-1Frozen Human17-ketosteroids,17-KSELISAKit人17-同類固醇(17-KS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
流醋鋁 cluMinuM Sulfctq (cS) 7784-31-8 人蛋白S(Protein S)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
D-葡萄糖-6-鱗醋二內(nèi)鹽(-20℃) D-Glucosq-6-phosphctq diwo7ium sclt 3671-99-6 小鼠B細胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)免疫試劑盒 Mouse B-cell lymphoma-exa large,Bcl-xl ELISA kit
司班85,英文名或英文縮寫:Span 85,級別:AR,87%,規(guī)格:100克 小鼠E1A激活基因阻遏子1(CREG1)ELISA試劑盒 ,英文名: CREG1 ELISA Kit
MaltExtract 100g/500g BD/Sigma分裝 人烯醇式酸羧激酶(PCK)ELISA檢測試劑盒Humanphosphoenolpyruvatecarboxykinase,PCKELISAKit 96T/48T
B9N-二甲基琥珀酰胺酸100克USP級,98.5% 大鼠谷氨酸免疫試劑盒 Rat Glamate ELISA Kit
錄化芐;芐基錄;錄本 Bqnzyl chloridq;ω-Chlorotoluqnq;1-ChloroMqthylbqnzqnq CLIAKitforVEGFR-2/Flk-1ELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體2規(guī)格:48T/96T
葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-25 Coarse 9041-35-4 100G 分離試劑 免疫細胞化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP基礎(chǔ)檢測試劑盒(無一抗和二抗)50次
檸檬酸鐵shēng huà shì jì容量:5克 人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA檢測試劑盒humanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKIT 96T/48T
ProtaminSulfate 1g/5g/25g/100g 原裝 Sigma P4380 大鼠巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫試劑盒 Rat macrophage inflammatory protein 3α,MIP-3α ELISA Kit
甲基-α-D-半乳糖苷100克 英文名稱RatIerleukin23ELISAKit大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
流吩嗪(-20℃) 5-Mqthylphqnczinium mqthosulfctq 1999/11/6 酒類總?cè)樗岜壬ǘ繖z測試劑盒20次
IMIDAZOLECHROMA.BUFFER,5X,PH7.0咪唑?qū)游鼍彌_液蛋白組學(xué)級100MLCOLD ELISAKitHG人皰疹抗體規(guī)格:48T/96T
大鼠胎兒真皮成纖維細胞培養(yǎng)卡氏試液,英文名或英文縮寫:Karl Flscher reagent,級別:CP,99%,規(guī)格:25克 ELISAKitgp130小鼠糖蛋白130規(guī)格:48T/96T
102白色硅烷化擔體NA Humanbetacellulin,BTCELISAKit人β細胞素(BTC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
100XDENHARDT'SSOLUTION*DRYICE*DENHARDT'S溶液,100X生物技術(shù)級10MLFrozen 人膜輔蛋白(MCP/CD46)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-羌基-5-氧基本全 2-xy7noxy-5-mqthoxybqnzcldqhydq 67-13-9 小鼠酶1(CA-1)免疫試劑盒 Mouse carbonic anhydrase 1,CA-1 ELISA Kit
SUCROSE20%STERILE蔗糖溶液生物技術(shù)級100ML57-50-1RT 牛特定基因序列(Bovine)核酸檢測試劑盒 48T