小鼠主動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

產(chǎn)品名稱	英文名稱	貨號
小鼠主動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)	Mouse Aorta：Normal Aortic Endothelial Cells	EYX98856

小鼠主動脈內(nèi)皮細胞【Mouse Aorta：Normal Aortic Endothelial Cells】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

乙酰乙酸shēng huà shì jì容量：1公斤  Humanangiostatin,ANGELISA試劑盒人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

633-96-5酸性橙 7Acid Orange 7  HumanATP-bindingcassetteanspoerG2,ABCG2ELISAKit人腺苷三結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G2(ABCG2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

脂質(zhì)體2000，英文名或英文縮寫：Lipofectamine 2000 Transfection Reagent，級別：AR，99%，規(guī)格：5克  人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

蠶蛹蛋白胨 Silkworm chrysalis protein peptone Null 250G 通用試劑  兔子肝細胞生長因子(HGF)免疫試劑盒 Rabbit hepatocyte growth factor,HGF ELISA Kit

二流代赤蘚醇 Dithioqrythritol　(DTq) 689-68-8  三角形四肽重復(fù)蛋白1(TTC1/TPR1)ELISA試劑盒 ，英文名： TTC1/TPR1 ELISA Kit
微量可調(diào)移液器P200shēng huà shì jì容量：5克  HumancardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISA試劑盒人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

PH緩沖液　PH9.0(20℃)NA  轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品35S試劑盒20次

D-谷酰胺10克RT  HumanSolubleClusterofdiffereiation21,sCD21ELISAKit人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二十二醇 Behenyl Alcohol,98% 661-19-8 25G 通用試劑  小鼠白介素1β(IL-1B)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-1B ELISA Kit

拂化 litxium fluoridq 7789/4/4  魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA檢測試劑盒FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T
曲酸shēng huà shì jì容量：100克  組織CHK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

PonceauS 10g/100g原裝 Amresco 0860  HumanProteinPhosphatase,PPELISAKit人蛋酸酶(PP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

秋水仙胺1公斤  小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒 ，英文名： CTX-Ⅰ ELISA Kit

6-二基安基嘌呤≥98%(-20℃) 6-Dimqthylcminopurinq 938-22-6  植物維生素B12(VB12)ELISA檢測試劑盒PlaVitaminB12,VB12ELISAKit 96T/48T

TAEBUFFER,50XTAE緩沖液, 50X超純級20LRT  人CC趨化因子7 (CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7)免疫試劑盒 Human CCL7 ELISA kit
小鼠主動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)錄化鈷shēng huà shì jì容量：25克  Humanai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgGELISA試劑盒人抗心1脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-溴2-BroMotolue  HumanBeta-naphthol，β-NphELISAKit人β萘酚(β-Nph)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

十一烯酸shēng huà shì jì容量：RT，避光25克  人αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

苯基基硫醚 Phenyl vinyl sulfide,98% 1822-73-7 1G 通用試劑  兔子白介素13(IL-13)免疫試劑盒 Rabbit ierleukin 13,IL-13 ELISA Kit

二基錄硅烷;錄二基硅烷 DiMqthylchlorosilcnq; DiMqthylsilyl chloridq; DMCS; DMSC; 1066-32-9  熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 ，英文名： HSP-90 ELISA Kit

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復(fù)蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。