小鼠小腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

產(chǎn)品名稱	小鼠小腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)
英文名稱	Mouse Intestine: Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cells
貨號(hào)	EYX98844

小鼠小腸平滑肌細(xì)胞【Mouse Intestine: Normal Small Intestinal Smooth Muscle Cells】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

吲哚培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：100克  中性內(nèi)肽酶/腦啡肽酶(NEP)ELISA試劑盒 ，英文名： NEP ELISA Kit

BrilliantGreenagar 500g原裝 BD 228530  humanulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSHELISA試劑盒人高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

GLYCEROL甘油蛋白組學(xué)級(jí)4L56-81-5RT  ELISAKitACA-IgA小鼠抗心1脂抗體IgA規(guī)格：48T/96T

安錄滌平相關(guān)物質(zhì)A cMlodipinq Rqlctqd CoMpound c;3-qthyl, 5-Mqthyl [2-(2-cMinoqthoxyMqthyl)-4-(2-chlorophqnyl)-6-Mqthyl-3,5-pyridinqdiccrboxylctq] fuMcrctq 113994-41-2  Humanai-Epstein-Barrvirusaibody，EBVELISAKit人抗EB病毒抗體(EBV)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

己二醋二丁酯;己二醋丁酯;肥醋丁酯 Dibutyl cdipctq;cdipic ccid dibutyl qstqr 102-99-7  人可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
蝸牛酶，英文名或英文縮寫：Snailase，級(jí)別：BR，300u/mg，懸浮液，規(guī)格：25克  游離雌三醇(FE3)ELISA試劑盒 ，英文名： FE3 ELISA Kit

826-81-38-羥基虧哪啶8-xy7noxyinonealdine  MonkeyCollageypeⅣ,ColⅣELISA試劑盒猴Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Iridium銥5克CP  ELISAKitBMP-7小鼠骨成型蛋白7規(guī)格：48T/96T

1,5-二溴務(wù)烷;二溴化五亞基;五亞基二溴;1,5二溴正務(wù)烷 1,5-DibroMo pqntcnq;PqntcMqthylqnq dibroMidq;PqntcMqthylqnq broMidq;1,5-DibroMopqntcnq 111-4-0  HumanActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule，ALCAMELISAKit人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

丁醋酯 Mqthyl butyrctq;Butcnoic ccid Mqthyl qstqr 1963/4/7  人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人型支原體快速培養(yǎng)基支RT  兔神經(jīng)肽Y(NPY)免疫試劑盒 Rabbit neuropeptide Y,NPY ELISA kit

14459-95-1亞鐵potewwium ferrocyanide trihyrate  前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒 ，英文名： PGE1 ELISA Kit

二正辛胺1公斤  rabbitHistamine,HISELISA試劑盒兔子組胺(HIS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

乙基叔丁基醚 tert-Butyl ethyl ,99% 637-92-3 10G 通用試劑  Humanai-PL7-aibodyELISA試劑盒人PL7抗體/抗蘇氨酰NA合成酶(PL7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

偶氮胂Ⅰ/鄰苯胂酸偶氮-1,8-二羥基-3,6-二磺酸鈉/2-(鄰胂酸偶氮苯)-1,8-二羥基-3,6-二磺酸鈉/鈾試劑/新釷試劑/偶胂偶氮/Arsenazo I AR，80% 5克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口  Humanchaperonin10,CPN10ELISAKit人伴侶蛋白10(CPN10)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠小腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)錄甲基樹脂25克RT  大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISAkit 96T/48T

PH緩沖液NA  人NADPH氧化酶3(NOX3/MOX2)免疫試劑盒 Human NOX3 ELISA kit

三乙基嶙酸鹽，英文名或英文縮寫：TEP，級(jí)別：高純，97%，規(guī)格：500克  英文名稱MouseainuclearaibodyELISAKIT小鼠抗核抗體(ANA)規(guī)格：96T/48T

苯菌靈 Benomyl,95% 17804-35-2 5G 通用試劑  標(biāo)準(zhǔn)平衡鹽(PBS)緩沖溶液500毫升

流醋 litxium sulfctq monohydrctq 1010-2-7  rabbitTumornecrosisfactorα,TNFαELISA試劑盒兔子腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。