詳細(xì)介紹
大鼠心肌成纖維細(xì)胞【Rat Heart: Normal Heart Fibroblasts】
產(chǎn)品描述:公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織,公司提供的大鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件,以降低雜細(xì)胞的污染,同時的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下,原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài),進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
大鼠心肌成纖維細(xì)胞價格 | Rat Heart: Normal Heart Fibroblasts | EYX98933 |
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細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
實驗事項:
1. 試劑準(zhǔn)備:所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品,酶結(jié)合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。
注意事項:
1. 接收到,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
氧化鋯10克 HumanLDL-ICELISA試劑盒人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
基乙磺酸) 組織絡(luò)氨酸酶(TP)活性比色法定量檢測試劑盒20次
鉬酸shēng huà shì jì容量:5克 Humaninsulin-likegrowthfactors2,IGF-2ELISAKit人胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
N-基-N-氧化嗎啉 4-Mqthylmorpholinq N-oxidq 729--8 人胰蛋白酶原Ⅱ(y-Ⅱ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量:100克 豬甾體合成急性調(diào)節(jié)蛋白(StAR)免疫試劑盒 Pig steroidace regulatory protein,StAR ELISA kit
隨機引物100毫克2~8℃ Rabbitoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISA試劑盒兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PH緩沖液 PH8.0(20℃)NA 小鼠白介素1α(IL1α)ELISA試劑盒 ,英文名: IL1α ELISA Kit
α-基間二氮茚,英文名或英文縮寫:2-Aminobenzimidazole,級別:AR,99.5%,規(guī)格:100克 人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA檢測試劑盒humanAi-thyroid-globulinaibody,ATGAELISAKIT 96T/48T
加雷沙星 Garenoxacin,98% 194804-75-6 20MG 通用試劑 大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)免疫試劑盒 Rat Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA kit
加醋;蟻醋 litxium forMctq 6108-3- 英文名稱Ratβ-ThromboglobulinELISAKit大鼠β血小板球蛋白(β-TG)規(guī)格:96T/48T
葡聚糖T500500u保存:-20℃ Humaotalprostatespecificaigen,tPSAELISAKit 人總前列腺特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
5256-79-1PSS-辛基本基取代物Octapxenylsilsesquioxane HumanCreatineKinase,CKELISA試劑盒人肌酸激酶(CK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬血清(無菌)shēng huà shì jì容量:RT25克 組織DNA損傷彗星*熒光檢測試劑盒20次
噠螨靈 Pyridaben 96489-71-3 250MG 通用試劑 Humanprostatespecificaigen,PSAELISAKit人前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-炳安醋 L-clcninq;(S)-2-cMinopropionic ccid;L-2-cMinopropionic ccid 26-41-7 豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGFβ3)ELISA試劑盒 ,英文名: TGFβ3 ELISA Kit
大鼠心肌成纖維細(xì)胞價格兩性霉素乙,英文名或英文縮寫:Amphotericin B,級別:BR,90%,規(guī)格:100克 HumanE-SelectinELISAKit人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乳酸菌MRS瓊脂 (+4℃)NA 牛結(jié)蛋白(Des)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
PluronicPE6800聚醚PE 6800試劑級RTsigma 人轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)免疫試劑盒 Human TGF-α ELISA Kit
3-溴-4- 3-Bromo-4-fluoro,98% 77771-02-9 5G 通用試劑 鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原(SCCAg)ELISA試劑盒 ,英文名: SCCAg ELISA Kit
阿布拉霉素 生物技術(shù)級,98% 5克 國產(chǎn)/進(jìn)口 RatBcl-2associatedXprotein,BaxELISA試劑盒大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T