人牙周膜組織提取物價格在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

產(chǎn)品名稱	人牙周膜組織提取物價格
英文名稱	Human Periodontal Ligament: Normal Periodontal Ligament Derivatives
貨號	EYX99356

人牙周膜組織提取物【Human Periodontal Ligament: Normal Periodontal Ligament Derivatives】

牙周病是口腔常見疾病,在世界范圍內(nèi)均有較高患病率。牙周組織健康被世界衛(wèi)生組織列為衡量人類健康的十項標準之一[1]。人牙周膜組織的主體細胞為成纖維細胞。公司科技提供來自新鮮或冷凍人牙周膜組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準的方案進行。所

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 

操作要點；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

Peptone 蛋白胨   2g /0g Doxifluridine94/9/5

Percoll 細胞分離液   0ml Tofacitinib 57379枸櫞酸托法替尼

PGA 3-磷酸甘油酸鈉鹽   25mg Fosaprepitant dimeglumine2651214

Phenol Red 酚紅   5gPazopanib4447312帕唑帕尼

Phytagel植物凝膠   0g /2gCapecitabine',3'-cyclic carbonate9217695卡培他濱
Dorzolomide hydrochloride  130693-82-2  中文名：鹽酸多佐胺  分子式：C10H17ClN2O4S3  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠甘油三酯脂肪酶   英文名稱：   Mouse iglyceride Lipase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TGL

Donepezil hydrochloride  120011-70-3  中文名：鹽酸多奈哌齊  分子式：C24H30ClNO3  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠甘油三酯   英文名稱：   Mouse iglyceride   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TG

Domperidone  57808-66-9  中文名：多潘立酮  分子式：C22H24ClN5O2  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠狀腺原酸   英文名稱：   T3 Mouse iiodothyronine   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   T3

Docosanoic acid  112-85-6  中文名：二十二烷酸  分子式：C22H44O2  度：%  關鍵詞：    小鼠狀腺原酸elisa試劑盒   小鼠狀腺原酸試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠狀腺原酸試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠狀腺原酸試劑盒、小鼠狀腺原酸elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Docetaxel  114977-28-5  中文名：多西他賽  分子式：C43H53NO14  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠硫氧還蛋白還原酶elisa試劑盒   小鼠硫氧還蛋白還原酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠硫氧還蛋白還原酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠硫氧還蛋白還原酶試劑盒、小鼠硫氧還蛋白還原酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。
曲安西龍（標準品）  Triamcinolone  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 小鼠膜聯(lián)蛋白A1(ANXA1)ELISA試劑盒 ，英文名： ANXA1 ELISA Kit

舒林酸（標準品）  Sulindac  質(zhì)量規(guī)格：檢查 小鼠膜聯(lián)蛋白A2(ANXA2)ELISA試劑盒 ，英文名： ANXA2 ELISA Kit

HSP990  NVP-HSP990  質(zhì)量規(guī)格：>98%,Hsp90抑制劑 小鼠膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)ELISA試劑盒 ，英文名： ANXA5 ELISA Kit

鹽酸妥拉唑林（標準品）  Tolazoline HCl  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 小鼠膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白(FPN)ELISA試劑盒 ，英文名： FPN ELISA Kit

鹽酸硫利達嗪（標準品）  Thioridazine hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：鑒別 小鼠末端補體復合體C5b-9(C5b-9)ELISA試劑盒 ，英文名： C5b-9 ELISA Kit

鹽酸卡替洛爾（標準品）  2(1H)-QUINOLINONE  質(zhì)量規(guī)格：鑒別 小鼠末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA試劑盒 ，英文名： TCC C5b-9 ELISA Kit

二甲磺酸阿米三嗪（標準品）  Almitrine Bismesylate  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 小鼠末端補體復合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA檢測試劑盒MouseterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit 96T/48T

蘿巴新（標準品）  Raubasine  質(zhì)量規(guī)格：含量測定 小鼠墨蝶呤還原酶(SPR)ELISA試劑盒 ，英文名： SPR ELISA Kit

卡莫氟(標準品)  Carmofur  質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法含量測定用 小鼠母系蛋白2(MATN2)ELISA試劑盒 ，英文名： MATN2 ELISA Kit

尼可占替諾（煙酸占替諾）標準品  Xanthinol nicotinate  質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法含量測定用 小鼠母系胚胎亮酸拉鏈蛋白激酶(MELK)ELISA試劑盒 ，英文名： MELK ELISA Kit
人牙周膜組織提取物價格兔子α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISAKit                 5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one  中文名：  分子式：C8H8OS2 

兔子TH糖蛋白(THP)ELISA試劑盒     6-Aminopenicillanic acid  551-16-6  中文名：6-氨基青霉烷酸  分子式：C8H12N2O3S 

兔子S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒     6-Aminonicotinic acid  中文名：6-氨基煙酸  分子式：C6H6N2O2  度：98.0%

兔子S100蛋白(S-100)ELISAKit     6-Aminoindole  5318-27-4  中文名：6-氨基吲哚  分子式：C8H8N2 

兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒              6-Aminonicotinic acid  中文名：6-氨基煙酸  分子式：C6H6N2O2

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。