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人體視網膜組織提取物

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更新時間:2021-01-07 15:33:35瀏覽次數:617

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產品簡介

人體視網膜組織提取物在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

詳細介紹

產品名稱

人體視網膜組織提取物

英文名稱

Eye: Normal Human Retinal Derivatives

貨號

EYX99343

人體視網膜組織提取物【Eye: Normal Human Retinal Derivatives

視網膜居于眼球壁的內層,是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體視網膜組織中高質量的總RNAPCR準備的第一條cDNA鏈,蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫院,采集工作根據IRB

總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。

 

實驗要點及說明;

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 

操作要點;

1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

Redzol(一步法總RNA提取試劑)1mln-Tritriacontan6,18-dione245146

RNasinRNA酶抑制劑)1,000UBi-linderone12273759

M-MLV反轉錄酶,000Uvibo-Quercitol4886

Fasta-II快速定點突變試劑盒15 rxnSuccinic acid15

Muta-direct™定點突變試劑盒15 rxn6-Deoxy-O-methyl-β-allopyranosyl(14)-β-cymaronic acid δ-lactone191313
Duloxetine hydrochloride  136434-34-9  中文名:鹽酸度洛西汀  分子式:C18H20ClNOS    土壤無機0S-PHOS)含量測試盒   可見分光光度法   50/24

Ritonavir  155213-67-5  中文名:利托那韋  分子式:C37H48N6O5S2    土壤脫氫酶(SDHA)測試盒   可見分光光度法   50/24           

3-O-Acetylandrostenone hydrazone  122914-94-7  中文名:3-O-乙酰基雄酮腙  分子式:C21H32N2O2    土壤纖維素酶(S-CL)試劑盒   可見分光光度法    50/24

Androstenone hydrazone  63015-10-1  中文名:雄酮腙  分子式:C19H30N2O    土壤酸性0酸酶(S-ACP)試劑盒   可見分光光度法   50/48

3,3-Dimethoxy-5α-androstan-17-one  3591-19-3  中文名:3,3-二甲氧基-5α-雄烷-17-  分子式:C21H34O3    土壤中性0酸酶(S-NP)試劑盒   可見分光光度法   50/48
去氧穿心蓮內酯 HPLC98% 5mg Helly固著液50毫升

去氧膽酸 HPLC98% 20mg HeneggImmunoglobulinofYolk,IgYELISA試劑盒雞卵黃球蛋白(IgY)ELISA試劑盒規格:96T/48T

脫氧膽酸鈉(牛) HPLC98% 20mg HepatitisBvirusRFLP基因分析試劑盒20

去氧紫草素 HPLC98% 20mg Hexamer(隨機引物)(200納克/微升)100微升

去乙酰車葉草苷酸 HPLC98% 20mg HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2

去乙酰華蟾毒精 HPLC95% 10mg HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2

去乙酰基Ophiopojaponin A  5mg HHV6-B(HUMANHERPESVIRUS6-B)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2

染料木苷 HPLC98% 20mg HHV病毒DNA化試劑盒20

染料木素 HPLC98% 20mg HIS(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升

人參二醇 HPLC98% 20mg HISTONEH3蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25
人體視網膜組織提取物兔血清總補體(CH50)ELISAKit     Adrenosterone  382-45-6  中文名:腎上腺甾酮  分子式:C19H24O3 

兔血清淀粉樣蛋白Aelisa試劑盒   兔血清淀粉樣蛋白A試劑盒   規格型號:96T/48T   兔血清淀粉樣蛋白A試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:兔血清淀粉樣蛋白A試劑盒、兔血清淀粉樣蛋白A elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。     7-Acetoxy-4-methylcoumarin  中文名:7-乙酰氧基-4-甲基香豆素  分子式:C12H10O4 

兔血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISAKit     5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine  29927-08-0  中文名:5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺  分子式:C9H10N2S 

兔血清(NO)ELISA試劑盒     5'-Deoxy-5-fluorocytidine  中文名:  分子式:C9H12FN3O4  度:99.0%

兔血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體1   英文名稱:   Rabbit Lctin like oxLDL Receptor 1   規格:   48T/96T   英文縮寫:   LOX-1  5'-Deoxy-5-fluorocytidine  66335-38-4  中文名:  分子式:C9H12FN3O4  度:99.0%

運輸和保存;
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

 

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