詳細(xì)介紹
人體表皮組織提取物【Skin: Normal Human Epidermis Derivatives】
人表皮主要由三種細(xì)胞構(gòu)成,除角質(zhì)形成細(xì)胞外,還包括黑素細(xì)胞和郎格漢斯細(xì)胞。此外,在某些部位還存在默克爾細(xì)胞。公司科技提供來(lái)自新鮮或冷凍人體表皮組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人體表皮組織提取物培養(yǎng) |
英文名稱(chēng) | Skin: Normal Human Epidermis Derivatives |
貨號(hào) | EYX99341 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明;
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
運(yùn)輸和保存;
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
操作要點(diǎn);
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿(mǎn)37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀(guān)察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
RIPA裂解液(強(qiáng))0 ml2-Hydroxytetracosanoic acid ethyl ester1241117
RNaseA溶液×1ml 2-Hydroxyquinoxaline11967
RNase-free水/DEPC水0ml /0ml2-Hydroxy-methylanthraquinone1724
Spectinomycin solution 壯觀(guān)霉素溶液5×1ml2-Flurbiprofen5154氟比洛芬
Streptomycin solution 鏈霉素溶液5×1ml2-Fluoroadenosine1468
Echinoynethiophene A 中文名: 分子式:C13H10O2S 豬C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISAKit
Ecdysterone 20,22-monoacetonide 中文名: 分子式:C30H48O7 豬可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISAKit
Dyphylline 中文名:二羥丙茶堿 分子式:C10H14N4O4 豬熱休克蛋白40elisa試劑盒 豬熱休克蛋白40試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬熱休克蛋白40試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬熱休克蛋白40試劑盒、豬熱休克蛋白40eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Duloxetine hydrochloride 中文名:鹽酸度洛西汀 分子式:C18H20ClNOS 豬熱休克蛋白20elisa試劑盒 豬熱休克蛋白20試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬熱休克蛋白20試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬熱休克蛋白20試劑盒、豬熱休克蛋白20eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
D-Tryptophan methyl ester hydrochloride 中文名: 分子式:C12H15ClN2O2 豬去甲上腺素elisa試劑盒 豬去甲上腺素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬去甲上腺素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬去甲上腺素試劑盒、豬去甲上腺素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
去氧孕烯 Desogestrel 質(zhì)量規(guī)格:>98% 沉淀法去內(nèi)試劑盒20
地索奈德 Desonide 質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 陳舊血紅細(xì)胞溶解液500毫升
甲磺酸加貝酯 Gabexate mesylate 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 成分比色法定量檢測(cè)試劑盒20
甲磺酸加貝酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Gabexate mesylate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 持久型ECL化學(xué)發(fā)光顯影試劑盒10
地塞米松,氟美松 Dexamethasone 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 持久型ECL印跡化學(xué)發(fā)光溶液A液:100毫升B液:500微升1000cm2
地塞米松,氟美松(標(biāo)準(zhǔn)品) Dexamethasone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 蟲(chóng)卵細(xì)胞活力和死亡體外裂卵(invioexcystation)定量檢測(cè)試劑盒20
鹽酸地爾硫卓 Diltiazem HCL 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 蟲(chóng)卵細(xì)胞活力和死亡細(xì)胞流式定量檢測(cè)試劑盒20
鹽酸地爾硫卓(標(biāo)準(zhǔn)品) Diltiazem HCL 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)品 蟲(chóng)卵細(xì)胞活力和死亡熒光定量檢測(cè)試劑盒50
地美司鈉 Dimesna 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 初級(jí)離心柱DNA回收試劑盒20
甲磺酸多拉司瓊 Dolasetron mesylate 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 創(chuàng)傷弧菌(Vibriovulnificus)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20
人體表皮組織提取物培養(yǎng)兔心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISAKit 5-Aminouracil 932-52-5 中文名:5-氨基尿嘧啶 分子式:C4H5N3O2
兔心肌肌鈣蛋白Ⅰelisa試劑盒 兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒、兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 5-Benzyl-1H-tetrazole 18489-25-3 中文名:5-芐基-1H-四唑 分子式:C8H8N4O 度:98.0%
兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISAKit 4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone 中文名: 分子式:C9H14O4
兔心肌鈣蛋白T(rabbit c) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide 中文名: 分子式:C13H15N3O2 度:98.0%
兔心肌鈣蛋白I(rabbit cTnI) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate 239463-72-0 中文名: 分子式:C22H25N3O2