小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞提取物培養(yǎng)在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞提取物【Mouse Airway: Normal Bronchial Smooth Muscle Cell Derivatives】

小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞提取物是從小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞提取的，小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞從正常小鼠支氣管組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

產(chǎn)品名稱	小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞提取物培養(yǎng)
英文名稱	Mouse Airway: Normal Bronchial Smooth Muscle Cell Derivatives
貨號(hào)	EYX99121

 

 

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

 

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

感病毒H7亞型RT-PCR檢測(cè)試劑盒/Raltegravir51485雷特格韋

感病毒H9亞型RT-PCR檢測(cè)試劑盒/Racecadotril8113消旋卡多曲

感病毒N9亞型 RT-PCR檢測(cè)試劑盒/Quinocetone8186喹烯酮

感病毒通用型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒Quinestrol1523炔雌醇環(huán)戊醚

感病毒H5亞型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒Quetiapine1119749喹硫平
Mepivacaine  96-88-8  中文名：甲哌卡因  分子式：C15H22N2O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠β葡糖苷酶elisa試劑盒   小鼠β葡糖苷酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠β葡糖苷酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠β葡糖苷酶試劑盒、小鼠β葡糖苷酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Menthyl-5-(4-amino-2-oxo-2H-pyrimidin-1-yl)-[1,3]oxathiolane-2-carboxylic acid  147027-10-9  中文名：  分子式：C18H27N3O4S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠β葡萄糖酸苷酶elisa試劑盒   小鼠β葡萄糖酸苷酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠β葡萄糖酸苷酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠β葡萄糖酸苷酶試劑盒、小鼠β葡萄糖酸苷酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Memantine hydrochloride  41100-52-1  中文名：鹽酸美金剛胺  分子式：C12H22ClN  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠脫氫表雄酯elisa試劑盒   小鼠脫氫表雄酯試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠脫氫表雄酯試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠脫氫表雄酯試劑盒、小鼠脫氫表雄酯elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Megestrol acetate  595-33-5  中文名：醋酸甲地孕酮  分子式：C24H32O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    大鼠二氧化酶elisa試劑盒   大鼠二氧化酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   大鼠二氧化酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠二氧化酶試劑盒、大鼠二氧化酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Mefenamic acid  61-68-7  中文名：甲滅酸  分子式：C15H15NO2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    人金葡菌腸elisa試劑盒   人金葡菌腸試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人金葡菌腸試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人金葡菌腸試劑盒、人金葡菌腸elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。
鹽酸氟西汀（標(biāo)準(zhǔn)品）  Fluoxetine Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠遲現(xiàn)抗原(VLA)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratverylateappearingaigen,VLAELISAKit 96T/48T

馬來(lái)酸氟伏沙明  Fluvoxamine maleate  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BP2007 大鼠雌二醇(E2)ELISA檢測(cè)試劑盒RatEsadiol,E2ELISAKit 96T/48T

馬來(lái)酸氟伏沙明（標(biāo)準(zhǔn)品）  Fluvoxamine maleate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠雌二醇受體(ER)ELISA檢測(cè)試劑盒ratEsadiolreceptor,ERELISAKit 96T/48T

福美斯坦  Formestane  質(zhì)量規(guī)格：>99% 大鼠雌激素(E)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratesogen,EELISAKit 96T/48T

福美斯坦(標(biāo)準(zhǔn)品)  Formestane  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠雌激素受體(ER)ELISA檢測(cè)試劑盒RatEsogeeceptor,ERELISAKit 96T/48T

福辛普利鈉  Fosinopril   質(zhì)量規(guī)格：度≥99.0%（HPLC） 大鼠雌三醇(E3)ELISA檢測(cè)試劑盒RatEsiol,E3ELISAKit 96T/48T

呋塞米（速尿）  Furosemide  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 大鼠促黃體激素(LH)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratleoopichormone,LHELISAKit 96T/48T

呋塞米（標(biāo)準(zhǔn)品）  Furosemide  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 大鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA檢測(cè)試劑盒RatThyroidStimulatingHormone,TSHELISAKit 96T/48T

吉非羅齊  Gemfibrozil  質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratthyroopin-releasinghormone,HELISAKIT 96T/48T

吉非羅齊（標(biāo)準(zhǔn)品）  Gemfibrozil  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 大鼠促卵泡素(FSH)ELISA檢測(cè)試劑盒ratfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 96T/48T
小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞提取物培養(yǎng)成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子2   英文名稱：   Human Fibroblast Growth Factor 2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FGF-2  4-[2-[(3-Ethyl-4-methyl-2-oxo-3-pyrrolin-1-yl)carboxamido]ethyl]benzenesulfonamide  中文名：  分子式：C16H21N3O4S  度：98.0%

成纖維生長(zhǎng)因子-4   英文名稱：   fibroblast growth factor 4   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FGF-4  4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene  中文名：4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪  分子式：C30H22N2O2  度：98.0%

成纖維生長(zhǎng)因子-4   英文名稱：   fibroblast growth factor 4   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FGF-4  4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene  中文名：4,4'-雙(5-甲基-2-苯并惡唑基)芪  分子式：C30H22N2O2 

超氧化物歧化酶測(cè)elisa試劑盒   超氧化物歧化酶測(cè)試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   超氧化物歧化酶測(cè)試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：超氧化物歧化酶測(cè)試劑盒、超氧化物歧化酶測(cè)elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Bupivacaine hydrochloride  18010-40-7  中文名：鹽酸布比卡因  分子式：C18H29ClN2O 

超氧化物歧化酶（SOD）檢測(cè)   Superoxide dismase (SOD) detection  Xanthorin  17526-15-7  中文名：  分子式：C16H12O6  度：%  關(guān)鍵詞：  抗菌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)