Hypoxyprobe^TM-1 Kit 缺氧探針檢測(cè)試劑盒

搜索關(guān)鍵詞：

Hypoxyprobe, Inc.（缺氧探針公司）；Pimonidazole HCl；缺氧標(biāo)志物（Hypoxia maker）；Chemicon Inc.；

產(chǎn)品應(yīng)用：

免疫化學(xué)法檢測(cè)細(xì)胞和組織缺氧情況，包括免疫熒光（IF），免疫過(guò)氧化物酶，WB或流式細(xì)胞分析（FC）；

試劑盒組分：

試劑盒組分詳細(xì)描述：

一、Hypoxyprobe-1

Hypoxyprobe-1是2-硝基咪唑的替代物，其化學(xué)名和wei一成分是Pimonidazole hydrochloride（Pimonidazole HCl），分子量為290.8，水溶性為400mM（=116 mg/ml），紫外吸收（324nm）的吸光系數(shù)為7020（0.9%生理鹽水）。

Hypoxyprobe-1的粉末和溶液形式皆具化學(xué)穩(wěn)定性。比如，固體形式的Hypoxyprobe-1于柔弱光線(xiàn)下室溫保存2年，UV和HPLC分析法評(píng)估無(wú)任何降解發(fā)生。溶于0.9%生理鹽水的Hypoxyprobe-1，濃度100g/L置于2-8℃保存4.5年，UV和HPLC分析法評(píng)估無(wú)任何降解發(fā)生。

作用機(jī)理：缺氧細(xì)胞中Pimonidazole被還原后得以活化。這一活化的中間物與蛋白質(zhì)、多肽和氨基酸中的巰基基團(tuán)（thiol groups）形成穩(wěn)定的加合物。Mab1抗體結(jié)合這些加合物從而能借由免疫化學(xué)法來(lái)檢測(cè)。

二、MAb1抗體

MAb1是小鼠IgG1單克隆抗體（克隆4.3.11.3），為雜交瘤細(xì)胞克隆4.3.11.3表達(dá)液過(guò)濾除菌后得到的上清液，含60μg/ml MAb1和0.15%疊氮鈉。

感興趣組織可用免疫組化檢測(cè)（IHC），冰凍切片或者福爾馬林固定的石蠟包埋切片；也可組織降解后用流式分析法檢測(cè)；或用WB檢測(cè)。典型情況下，MAb1抗體經(jīng)1:50稀釋后，取100μl到組織切片上。然后加合適的二抗方法來(lái)檢測(cè)Pimonidazole加合物。

使用指南：

1、 Animal Studies 動(dòng)物研究

研究正常或腫瘤組織缺氧首先通過(guò)靜脈注射（intravenous infusion）、腹腔注射（intraperitoneal injection）或口服（oral ingestion）法給Hypoxyprobe-1溶液，劑量為60mg/kg體重。比如，25g小鼠的探針用量為1.5mg/只小鼠。（高達(dá)400mg/kg的劑量用于小鼠無(wú)可見(jiàn)毒性或引起組織缺氧變化，但60mg/kg以zui低成ben給予良好的染色結(jié)果）。

給藥后，Hypoxyprobe-1分布到包括大腦的所有組織，且僅僅在氧濃度≤14μM（相當(dāng)于pO2=10mm Hg，37℃）的細(xì)胞內(nèi)與蛋白質(zhì)巰基形成加合物。除了腫瘤之外，正常組織如肝臟、腎臟和皮膚含pO2等于或低于10mm Hg的細(xì)胞，也會(huì)結(jié)合Hypoxyprobe-1。

2、Tissue cultures 組織培養(yǎng)

通常情況下，細(xì)胞懸液置于含100-200μM Hypoxyprobe-1的缺氧環(huán)境中孵育1-2h。之后細(xì)胞離心涂片、固定、MAb1和顯色或熒光二抗染色。

訂購(gòu)信息：原裝正品，現(xiàn)貨供應(yīng)。

文件下載：

1、HP1-Hypoxyprobe™-1 Kit 操作手冊(cè)

2、Hypoxyprobe frequently asked questions (FAQ) 常見(jiàn)問(wèn)題

3、Hypoxyprobe Kit Application 應(yīng)用文獻(xiàn)

相關(guān)產(chǎn)品：

— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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