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上海撫生實業有限公司
人永生化表皮細胞;HaCaT特性現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!
人永生化表皮細胞;HaCaT特性來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
人永生化表皮細胞;HaCaT特性 | 成纖維細胞樣 | 上海 | 3-5天 |
細胞名稱
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞源自一位62歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚,角蛋白、角化細胞交聯外膜蛋白、中間絲相關蛋白陽性。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 15%FBS
傳代方法 1:10~1:20傳代,每周換液2~3次
傳代情況 C2
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,11;D13S317:10,12;D16S539:9,12;D18S51:12;D19S433:13,14;D21S11:30.2;D2S1338:17,25;D3S1358:16;D5S818:12;D7S820:9,11;D8S1179:14;FGA:24;TH01:9.3;TPOX:11,12;vWA:16,17,OL;
同工酶
染色體 72~88
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
人操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
GPR102 英文名稱: G蛋白偶聯受體GPR102蛋白抗體 ?0.2ml
GPR37L1 英文名稱: G蛋白偶聯受體GPR37樣蛋白1抗體 ?0.2ml
GPR105 英文名稱: G蛋白偶聯受體GPR105蛋白抗體 ?0.2ml
GPR12 英文名稱: G蛋白偶聯受體GPR12蛋白抗體 ?0.2ml
GPR110 protein 英文名稱: G蛋白偶聯受體GPR110蛋白抗體 ?0.2ml
GPR125 英文名稱: G蛋白偶聯受體GPR125蛋白抗體 ?0.2ml
GPCR RTA 英文名稱: G蛋白偶聯受體RTA蛋白抗體 ?0.2ml
GPR155 英文名稱: G蛋白偶聯受體GPR155蛋白抗體 ?0.2ml
GPR30 英文名稱: G蛋白偶聯受體GPR30蛋白抗體 ?0.2ml
GPR86 英文名稱: G蛋白偶聯受體GPR86蛋白抗體 ?0.2ml
GPCR HM74 英文名稱: G蛋白偶聯受體HM74蛋白抗體 ?0.2ml
GMCL1L 英文名稱: 細胞樣蛋白1樣蛋白抗體 ?0.2ml
phospho-GAB2 (Tyr452) 英文名稱: 磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體 ?0.1ml
phospho-GAB2 (Tyr643) 英文名稱: 磷酸化接頭蛋白Gab2抗體 ?0.1mlsm Actinin- Alpha(Human skeletal muscle Actinin- Alpha) ELISA Kit 人橫紋肌輔肌動蛋白α Multi-class antibodies 規格: 48T
BMP-7(Human Bone morphogenetic protein 7) ELISA Kit 人骨成型蛋白7 Multi-class antibodies 規格: 48T
25(OH)D3/25 HVD3(Human 25-Dihydroxy vitamin D3)ELISA Kit 人25羥基*3 Multi-class antibodies 規格: 48T
LTB4(Human Leukotriene B4) ELISA Kit 人白三烯B4 Multi-class antibodies 規格: 48T
iFABP(Human intestinal fatty acid binding protein) ELISA Kit 人腸脂肪酸結合蛋白 Multi-class antibodies 規格: 48T
OxLDL(Human oxidized lowdensity lipoprotein) ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白 Multi-class antibodies 規格: 48T
MPIF-1/CCL23(Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1) ELISA Kit 人骨髓抑制因子1 Multi-class antibodies 規格: 48T
ADP(Human adiponectin) ELISA Kit 人脂聯素 Multi-class antibodies 規格: 48T
HIS(Human Histamine) ELISA KIT 人組胺 Multi-class antibodies 規格: 48T
Human Resistin ELISA KIT 人抵抗素 Multi-class antibodies 規格: 48T
ALP-B(Human Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit 人骨特異堿磷酸酶B Multi-class antibodies 規格: 48T
OT/BGP(Human Osteocalcin/Bone gla protein) ELISA kit 人骨鈣素/骨*蛋白 Multi-class antibodies 規格: 48T
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