【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 綠色熒光蛋白標記小鼠前胃癌細胞；MFC-GFP使用說明書
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 轉染pEGFP-N1，穩定表達綠色熒光蛋白。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；G418 200ug/ml
傳代方法 1:3傳代；2~3天1次。
傳代情況 P5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
CHK2 細胞周期檢測點激酶2抗體
Cyclin T1 周期素依賴激酶9抗體
Cdc6 細胞分裂周期蛋白6抗體
C9orf116 9號染色體開放閱讀框116抗體
phospho-c-Jun(Ser63) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體
phospho-CREB-1(Ser133) 磷酸化CREB-1抗體
C1orf229 1號染色體開放閱讀框229抗體
Cecropin 殺菌肽/天蠶抗菌肽抗體
Cullin 4A Cullin 4a蛋白抗體
CK3 細胞角蛋白3抗體
C5orf52 5號染色體開放閱讀框52抗體
CCDC85B 卷曲螺旋結構域蛋白85B抗體CL-0287 M14(人黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0367 IM-9(人外周血B淋巴細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0368 INS-1(大鼠胰島細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0369 IR983F(大鼠骨髓瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0370 J774A.1(小鼠單核巨噬細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0371 K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0372 KATO III(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0373 KiMA(人胚腎上皮細胞系) 5×106cells/瓶×2
CL-0374 KP-N-NS(人腎上腺神經母細胞瘤細胞(腦轉移)) 5×106cells/瓶×2
CL-0390 NCI-H1703(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0391 NCI-H205(人腎上腺腺瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0392 NCI-H2087(人非小細胞肺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0393 NCI-H209(人小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0394 NCI-H2170(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2
