【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 雜交瘤（B類）；C3110D2B2培養
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 可產生單克隆抗體；凍存前做支原體去除
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 保持細胞密度在1×105～1×106 cells/ml之間，每周換液2～3次
傳代情況
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權限 B類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
phospho-ERK1 (Thr202/Tyr204) + ERK2 (Thr183/Tyr185) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體
EPHB4 *蛋白激酶受體B4抗體
Ephrin A5 *蛋白激酶A5受體抗體
epithelial Sodium Channel gamma 上皮鈉離子通道蛋白γ/γENaC抗體
ETS2 癌基因ETS2抗體
Endothelin 3 內皮素3抗體
phospho-ERK5 (Ser496) 磷酸化細胞外信號調節激酶5抗體
phospho-ERK5 ( Ser731+Thr733) 磷酸化細胞外信號調節激酶5抗體
ERK4 細胞外信號調節激酶4抗體
E.coli O157:H7 腸出血大腸桿菌埃希氏菌O157:H7抗體
phospho-ERK1 (Thr202+Tyr204) + ERK2 (Thr185+Tyr187) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶ERK抗體
EMR2 CD312抗體
eIF4EBP1 eIF4E結合蛋白抗體
Phospho-EGFR (Ser1045) 磷酸化表皮生長因子受體抗體
Phospho-EGFR (Tyr1138) 磷酸化表皮生長因子受體抗體改良MSRV培養基 250g 用于沙門氏的分離培養（MERCK方法）
MSRV Medium，Modified
SCCRAM肉湯 250g 濾膜法食品中沙門氏菌前增菌（SN/T1059.1）
SCCRAM Broth
BPL瓊脂 250g 用于食品中沙門氏菌選擇性分離培養
BPL Agar
改良BPLS瓊脂 250g 用于各種標本中沙門氏菌選擇性分離培養（ISO標準）
MIO培養基 250g 用于動力、吲哚和*試驗（FDA方法）
MIO Medium
XLT4瓊脂 250g 用于食品中致病菌，特別是沙門氏菌分離培養
XLT4 Agar
