細胞名稱 小鼠胚胎成纖維細胞；PA317實驗方法
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 PA317細胞株源自TK- NIH/3T3細胞，通過pBR322中的包裝結構DNA(pPAM3)和pBR322中的單純皰疹病毒胸苷激酶基因共同轉染構建而成。通過感染或轉染將逆轉錄病毒載體導入這些細胞，生成可以感染許多哺乳動物細胞的雙嗜性載體顆粒。這株細胞生成的病毒顆粒已成功地用于將基因導入人體。可能因為轉入DNA丟失，能夠包裝逆轉錄病毒載體的PA317細胞百分比隨傳代而減少。在含0.03 mM 次黃嘌呤, 0.001 mM 氨甲喋呤和0.02 mM 胸苷的培養基中短暫(大約5天)選擇，可以選出保留了包裝功
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:10傳代,5~10天一次，2~3天換液1次
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR -
同工酶
染色體 22~29;58~64
使用權限 A類
優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
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操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
脊椎蛋白1(SPON1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
互聯蛋白神經元中間絲蛋白α(INα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
Lin-28同源物A(LIN28A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
受磷蛋白(PLN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
無翅型MMTV整合位點家族成員3A(WNT3A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
再生胰島衍生蛋白3γ(REG3γ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
蘭尼定受體1(RYR1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
核因子I/B(NFIB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
R-脊椎蛋白1(RSPO1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
神經顆粒素(NRGN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
橋粒聯結蛋白(AHNAK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
肌鈣蛋白T(TNT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
分泌跨膜蛋白1(SECTM1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
肥大細胞類*1(CMA1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
無翅型MMTV整合位點家族成員3(WNT3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
無翅型MMTV整合位點家族成員2(WNT2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
無翅型MMTV整合位點家族成員1(WNT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
序列相似家族5成員C(FAM5C)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
白1抗體
Kir6.2 ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗體
GIRK2/Kir3.2 G蛋白激活內流鉀通道蛋白2抗體
AVPR2 *加壓素受體2抗體
Bdkrb2/B2R 緩激肽B2受體抗體
Axin1 軸蛋白1抗體
Anei-ATX/Autotaxin 自分泌運動因子抗體
Aurora A/ARK-1/AURKA 有絲分裂激酶A抗體
Aurora B/STK-1 有絲分裂激酶B抗體
phospho-PTPRA(Tyr798) 磷酸化*磷酸酶α抗體
phospho-PTPRA(Ser180) 磷酸化*磷酸酶α抗體
Aurora C 有絲分裂激酶B抗體
Aurora A/B/C 有絲分裂激酶A/B/C抗體
LEO1 RNA聚合酶相關蛋白LEO1抗體
B7-H1/PD-L1/CD274 程序性死亡配體1抗體
B7-DC/CD273/PDL2 程序性死亡配體2抗體
ICOS-L/B7-H2/CD275 誘導協同刺激分子配體CD275抗體
phospho-LEO1(Ser551) 磷酸化RNA聚合酶相關蛋白LEO1抗體
ICOS-L/B7-H2/CD275 誘導協同刺激分子配體CD275抗體
CT054/C20orf54 核黃素轉運蛋白2抗體
ZDHHC21 γ-氨基丁酸A受體相關膜蛋白3
ASGPR1/ASGR1 唾液酸糖蛋白受體1抗體
ITPR1 5-三磷酸肌醇受體1抗體
GPI 糖磷脂酰肌醇抗體
B7H4 B7-H4抗體
ITPR2 5-三磷酸肌醇受體2抗體
BAAT 長鏈脂肪酸酰基*水解酶抗體
Exendin 4 GLP1類似蛋白Exendin4抗體
BACE1/ASP2 β分泌酶抗體
phospho-BACE1(Ser498) 磷酸化β分泌酶抗體
Phospho-Bad(Ser118) 磷酸化相關死亡促進因子抗體
