【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
1.產品名稱：兔氣管上皮細胞操作步驟
2.組織來源：氣管組織
3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介：
兔氣管上皮細胞分離自氣管組織；氣管（Trachea），呼吸器官的一部分；為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣，與環狀軟骨相連；向下至第四、五胸椎體（相當胸骨角平面）交界處，分左、右主支氣管，分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環狀軟骨構成，有彈性，軟骨為“C”字形的軟骨環，缺口向后，各軟骨環以韌帶連接起來，環后方缺口處由平滑肌和致密結締組織連接，保持了持續張開狀態。管腔襯以粘膜，表面覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒，纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出，以凈化吸入的氣體。氣管上皮是氣道與外界環境接觸的*道防線，不僅是各種病原體、炎癥介質作用的靶細胞，還作為效應細胞合成、釋放多種炎性介質和細胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應。體外培養的原代氣管上皮細胞因與體內組織在形態結構和功能活動上存在很大的相似性，因此，在基礎及臨床研究中極為重要。
本公司的兔氣管上皮細胞采用*-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息：
M199、FBS、上皮細胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩定的實驗體系，優秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
peptide
*標記的羊抗大鼠IgG Thymosin Alpha-1
PE-Cy3標記的羊抗大鼠IgG Caspase-12
PE-CY5標記的羊抗大鼠IgG Caspase-12(hunman)
APC標記的羊抗大鼠IgG TmR2(GDNFR Beta；TRN-R；GFR-alpha-2；NTNR-2)
Alexa Fluor 350標記的羊抗大鼠IgG TNF-Alpha(Tumor Necrosis Factor-Alpha)
Alexa Fluor 488標記的羊抗大鼠IgG rh-TNF alpha protein GST Tagged
PE-Cy5.5標記的羊抗大鼠IgG TRA16
Cy3標記的羊抗大鼠IgG rh-IL-1Ra(Recombinant Human Interleukin-1 receptor antagonist His Tag)
Cy5標記的羊抗大鼠IgG E.coli DH-5 Alpha(E.coli DH-5 Alpha Protein)
Cy5.5標記的羊抗大鼠IgG Tranthyretin
Cy7標記的羊抗大鼠IgG rh-EGF(Recombinant Epidermal growth factor)
Alexa Fluor 555標記的羊抗大鼠IgG TrK A (h-NGFR) (p140- TrK A)
Alexa Fluor 647標記的羊抗大鼠IgG TrK A.B.C
辣根過氧化物酶標記的羊抗豚鼠IgG active Caspase 3(caspase-3 p12 subunit)
*標記的羊抗豚鼠IgG r-GST(Recombinant Glutathione S-T Ahents)
Cy5標記的羊抗豚鼠IgG CASP4(Caspase-4)
Cy5.5標記的羊抗豚鼠IgG Trk B
Cy7標記的羊抗豚鼠IgG GDF8/MSTN(growth differntiation factor 8)
PE標記的羊抗豚鼠IgG Trk B
PE-Cy3標記的羊抗豚鼠IgG Trk C
PE-CY5標記的羊抗豚鼠IgG TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(NT)
APC標記的羊抗豚鼠IgG Caspase-8 (pro Mch5)
Alexa Fluor 350標記的羊抗豚鼠IgG TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(CT)
Alexa Fluor 488標記的羊抗豚鼠IgG TY3H ( Tyrosine Hydroxylase )
Alexa Fluor 555標記的羊抗豚鼠IgG
PFKP(Human phosphofructokinase-plaet) ELISA Kit 人血小板型磷酸果糖激酶 48T
UGCG(Human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase) ELISA Kit 人尿苷二磷酸葡萄糖神經酰胺葡萄糖基轉移酶 48T
Casp4(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit 人凋亡相關半*肽酶4 48T
PDXK(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit 人吡哆醛/吡哆醇*6激酶 48T
DPYSL2(human dihydropyrimidinase-like 2) ELISA Kit 人二氫嘧啶酶樣2 48T
SGK2(Human serum/glucocorticoid regulated kinase 2) ELISA KIT 人血清/糖皮質激素調節激酶2 48T
MKK6(Human mitogen activated protein kinase kinase 6) ELISA Kit 人絲裂原活化蛋白激酶激酶6 48T
PDXP(Human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase) ELISA Kit 人吡哆醛/吡哆醇*6磷酸酶 48T
Tgtp(Human T-cell specific GTPase) ELISA Kit 人T細胞特異性鳥苷三磷酸酶 48T
FDFT1(Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1) ELISA Kit 人法尼基二磷酸法尼基轉移酶1 48T
D-LDH(Human D-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人D-乳酸脫氫酶 48T
Alpha1-AT(Human Alpha1-Antitrypsin) ELISA Kit 人α1抗* 48T
KLK 1(Human Kallikrein 1) ELISA Kit 人*1 48T
KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit 人*6 96T
PaCoA(Human Phosphorylated acetyl CoA) ELISA Kit 人磷酸化乙酰* 48T
PGAM2(Human phosphoglycerate mutase 2) ELISA Kit 人磷酸甘油酸變位酶2 48T
