傳統的抗體稀釋液常用的有:脫脂奶粉、TBST、PBST、BSA、市售的抗體稀釋液。在選擇抗體稀釋液需要注意的問題有哪些呢?
1、脫脂奶粉不能用于磷酸化蛋白,保存時間短,顏色變綠,要更換新的抗體,昂貴的抗體不建議使用。
2、PBST不能用來稀釋堿性磷酸酶(AP)標記的抗體,含AP標記的二抗不能使用PBST稀釋。
3、抗BSA的抗體不能使用含BSA的抗體稀釋液,能與BSA結合的抗體,會發生交叉反應,產生背景。
4、含有疊氮鈉的市售抗體稀釋液,不能用來稀釋辣根過氧化酶 (HRP)標記的抗體,且有毒,用時小心。
5、對于初次使用抗體時,TBST更安心。
傳統的抗體稀釋液有這么多局限性,那有沒有通用型的抗體稀釋液,可以適用于磷酸化,AP、HRP等偶聯的抗體,并且在降低背景的同時,有增強信號的作用,無需煩惱選用哪種抗體稀釋液,也不用再在丁香園、小木蟲等網站求助。
事實上,Abbkine增強型抗體稀釋液—BMU103-CN SuperKine™ 增強型抗體稀釋液,可以解決這個問題,它不僅有增強抗體的效果,且無蛋白,純化學試劑成分,適用AP,磷酸化,HRP等偶聯的抗體。
此外,它還有一定的保存效果,且不含磷酸鹽、疊氮鈉等成份,含有的抗體結合增強成份,可有效增強抗原與抗體的結合反應,減少抗體使用量,以節約抗體。
純化學成分—— 無動物蛋白,無抗原抗體交叉反應風險。
信號增強——含有抗體抗原結合增強成份,且無磷酸鹽。
節時快捷——孵育1h就可以達到很強的效果,無需過夜,實現1天能做完WB的夢想。
兼容性好——兼容辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶和生物素標記的二抗。
安全無毒——加入新型的防腐劑,無疊氮鈉,無毒健康,使用安心。
即用溶液——無需稀釋,直接使用。
適用廣泛——適用于多種免疫檢測實驗(WB、IHC、ELISA、IF)。
以NF-kB為例,看下效果:
圖:Superkine™ 增強型抗體稀釋液(BMU103-CN)與普通抗體稀釋液(TBST)以及同級競品(B品牌)進行對比WB實驗
蛋白樣品:HEK293細胞;
一抗(NFkB 小鼠單克隆抗體, ABM0017,1:5000)溶液室溫孵育1 h,TBST洗滌;
二抗(辣根過氧化物酶標記山羊抗鼠IgG, A21020,1:10000)溶液室溫孵育1 h,TBST洗滌;
ECL發光液(超敏型ECL發光液(飛克級)貨號:BMU102-CN)孵育1-2 min,然后曝光相同時間成像。
注意事項:抗體稀釋的濃度依據自己的實驗自己摸索的,不同實驗中,不同抗體稀釋倍數不同。
文章來源:Abbkine
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