MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)是一種非常經典的細胞增殖和細胞毒性檢測試劑盒,被廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的檢測。
艾美捷MTT細胞增殖檢測試劑盒測定原理:
Cell Biolabs艾美捷MTT細胞增殖檢測試劑盒含有足夠的試劑用于評估在96孔板中進行960次測定或在24孔板中進行192次測定。細胞可以被鍍,然后用影響增殖的化合物或藥劑。然后用增殖試劑檢測細胞,在活細胞中由黃色四唑MTT轉化為紫色福爾馬贊形式細胞還原酶。細胞增殖的增加伴隨著信號的增加,雖然細胞增殖(和信號)的減少可以表明化合物的毒性作用或次優的培養條件。
該測定原理是基本的,可應用于大多數真核生物細胞系,包括貼壁和非貼壁細胞以及某些組織。這種細胞增殖試劑可用于檢測細菌,酵母,真菌,原生動物以及培養的哺乳動物中的增殖和魚細胞。
艾美捷MTT細胞增殖檢測試劑盒相關參數:
全稱:CytoSelect MTT細胞增殖分析試劑盒
英文:CytoSelect MTT Cell Proliferation Assay
編號:CBA-252
規格:960assays
存儲:MTT細胞增殖測定試劑是一種透明的黃色即用溶液儲存于-20°C,避光。在室溫下儲存洗滌劑溶液。如果沉淀或在洗滌劑溶液中觀察到渾濁,將溶液加熱至37°C 10–20分鐘使用前攪拌以溶解沉淀物。
套件組件
1.MTT細胞增殖測定試劑(部件號125201):一瓶10mL MTT試劑。
2.洗滌劑溶液(部件號125202):一瓶100毫升洗滌劑溶液
艾美捷MTT細胞增殖檢測試劑盒測定方案:
1.制備含有0.1-1.0 x 106的細胞懸液培養基中的細胞/ml。
2.將每孔100μL加入96孔細胞培養板或每孔500μL加入24孔細胞培養物中有或沒有待測化合物的板。細胞在37°C和5%培養24-96小時加濕培養箱中的二氧化碳。
3.加入10μlCytoSelect™ MTT細胞增殖測定試劑,如果使用96-孔板,或24孔板的每個孔50µL。
4.在37°C和5%CO2下孵育平板3-4小時,直至可見紫色沉淀(細胞在光學顯微鏡下可以更精確地觀察到沉淀物)
5.在96孔板的每孔中加入100μL去污劑溶液,或在24孔板的每孔中加入500μL去污劑溶液盤子。
6.在室溫下孵育2小時至避光過夜。
注意:在井中與洗滌劑溶液長時間孵育可能導致沉淀或渾濁可以增加背景。如果觀察到沉淀,將板在37℃加熱10-20分鐘并攪拌溶解沉淀物。
7.使用540-570nm作為主波長讀取吸光度。
MTT細胞增殖檢測試劑盒部分引用文獻:
1. Housein, Z. et al. (2021). In vitro anticancer activity of hydrogen sulfide and nitric oxide alongside nickel nanoparticle and novel mutations in their genes in CRC patients. Sci Rep. 11(1):2536. doi:10.1038/s41598-021-82244-x.
2. Yoshiya, S. et al. (2020). Impact of Capicua on Pancreatic Cancer Progression. Ann Surg Oncol. doi: 10.1245/s10434-020-09339-z.
3. Zhou, K.I. et al. (2019). Regulation of Co-transcriptional Pre-mRNA Splicing by m6A through the
Low-Complexity Protein hnRNPG. Mol Cell. pii: S1097-2765(19)30535-0. doi:10.1016/j.molcel.2019.07.005.
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