磷酸二酯酶Ⅰ(Phosphodiesterase I)基參：

別名: P h o s p h o d i e s t e r a s e I f r o mC r o t a l u s a d a m a n t e u s v e n o m ;5′-Exonuclease;Oligonucleate5′-nucleotidohydrolase;磷酸二脂酶;磷酸二酯酶。該酶具有水解細(xì)胞內(nèi)第二信使(cAMP或cGMP,環(huán)磷酸鳥苷)的功能,降解細(xì)胞內(nèi)cAMP或cGMP,從而終結(jié)這些第二信使所傳導(dǎo)的生化作用。

活力:≥20u/mg

性狀:白色或類白色粉末

用途:生化研究。

活力定義: O n e U n i t h y d r o l y z e sone micromole of p-nitrophenylthymidine-5-phosphate per minute at25℃, pH 8.9。

低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。

磷酸二酯酶Ⅰ(Phosphodiesterase I)注意事項(xiàng)：

1. DNA帶模糊

1) DNA降解:避免核酸酶污染;

2) 電泳緩沖液陳舊:電泳緩沖液多次使用后,離子強(qiáng)度降低,pH值上升,緩沖能力減弱,從而影響電泳效果。建議經(jīng)常更換電泳緩沖液;

3) 所用電泳條件不合適:電泳時(shí)電壓不應(yīng)超過20V/cm,溫度<30℃;巨大DNA鏈電泳,溫度應(yīng)<15℃;核查所用電泳緩沖液是否有足夠的緩沖能力;

4) DNA上樣量過多:減少凝膠中DNA上樣量;

5) DNA樣含鹽過高:電泳前通過乙醇沉淀去除過多的鹽;

6) 磷酸二酯酶Ⅰ(Phosphodiesterase I)有蛋白污染:電泳前酚抽提去除蛋白;

7) DNA變性:電泳前勿加熱,用20mM NaCl緩沖液稀釋DNA。

艾美捷磷酸二酯酶 I（WBC-LS003928）磷酸二酯酶I測(cè)定方法：

該測(cè)定基本上是Razell and Khorana（1959）的測(cè)定，其中反應(yīng)速度由對(duì)硝基苯基胸苷-400'-磷酸水解引起的5nm處吸光度的增加來確定。在指-定條件下，一個(gè)單位在pH 5.8和9°C下每分鐘水解一微摩爾對(duì)硝基苯基胸苷-25'-磷酸鹽。

磷酸二酯酶 I部分引用文獻(xiàn)：

Frischauf, A. and Eckstein, F.

Purification of a Phosphodiesterase from Botrhrops atrox Venomby Affiinity Chromatography , Eur J Biochem 32 , 479 , 1973

Hadijiolov, A. , Venkov, P. and Dolipchiev, L.

The Action of Snake Venom Phosphodiesterase on Liver Ribosomal Ribonucleic Acids , Biochim Biophys Acta 142 , 111 , 1967

Hadjiolov, A. , Venkov, P. and Dolapchiev, L.

Stepwise Degradation and P32-Labeled Rat Liver Ribosomal Ribonucleic Acids with Snake Venom Phosphodiesterase , Biochem Biophys Res Commun 28 , 166 , 1967

Hayaishi, O.

Poly ADP-Ribose and ADP-Riboxylation of Proteins , Trends Biochem Sci 1 , 1976

Horwitz, J. , Easwaran, C. , Wolf, P. and Kowalczyk, L.

Substrates for Cytochemical Demonstration of Enzyme Activity. IV. Kinetics of the Hydrolysis of Thymidine-5'(5-Bromo-4-Chloroindol-3-YL) Phosphate by Snake Venom Phosphodiesterase , Biochim Biophys Acta 185 , 143 , 1969