艾美捷Fluorochrome熒光金背景：

熒光金的使用與其他熒光示蹤劑基本相同。主要區別在于Fluoro Gold在注射后存活時間、濃度范圍、組織治療以及與其他組織化學技術的兼容性方面更為靈活。

儲存和保質期：干燥的熒光金應保存在4攝氏度的不透光封閉容器中。正確儲存，Fluoro Gold的保質期應超過一年。溶液中的染料也應保存在4攝氏度的不透光封閉容器中，在這種情況下，它將保持穩定至少六個月。

Vehicle：氟金可溶解在蒸餾水或0.9%鹽水中，或用作0.2M中性磷酸鹽緩沖液中的懸浮液。

染料濃度：氟金已在1-10%的濃度范圍內成功使用。最初，建議濃度為4%。如果注射部位出現不希望的壞死，或標記過于強烈，則將濃度降低至2%溶液。如果需要使用更精確的測量，氟金的分子量為532.6道爾頓。

術后生存期

在兩天到兩個月的時間內觀察到良好的逆行標記。生存期通常為三到五天。長的存活期增強了遠端突起的填充，而不會使染料從細胞中擴散。

固定

幾乎可以使用任何固定劑，或者不使用固定劑；經常使用含有4%甲醛的磷酸鹽中性緩沖鹽水。含有高濃度重金屬（如鋨、汞）的固定劑會熄滅熒光，而高濃度（超過1%）的戊二醛可能會增加背景熒光。

Fluorochrome熒光金（FC10000）組織化學處理：

含氟金的組織可根據幾乎任何常見的組織學技術進行處理。這包括未固定組織的冷凍切片（10µm）、固定組織的冰凍切片（20µm）和從塑料（2-4µm）或石蠟（3-10µm）中嵌入的組織切下的薄片。固定組織的冰凍切片是常用的。

組合方法

在處理的這一點上，可以進一步處理切片以獲得第二標記，例如放射自顯影、HRP

組織化學、免疫細胞化學、第二熒光示蹤劑、熒光復染等。

安裝、清理和滑蓋

切片通常安裝在涂有明膠的載玻片上，風干，浸入二甲苯中，并用非熒光DPX塑料安裝介質覆蓋。除非與第二種示蹤劑不兼容，否則切片可以用分級醇脫水。如果熒光金與熒光免疫細胞化學結合，則將切片風干并直接用中性緩沖甘油（1:2）覆蓋。

檢查和攝影

熒光金可以使用寬帶紫外激發濾光片在熒光顯微鏡下觀察。當用中性pH緩沖液處理組織時發出金色，而當用酸性（例如pH 3.3）pH緩沖液加工組織時發出藍色。它可以用數碼或膠片拍攝（彩色打印使用Ektachrome 200-400 ASA膠片，黑白打印使用同等速度的膠片，例如Tri-X）。大多數曝光時間范圍為10-60秒，取決于物鏡放大率和標簽強度。三十（30）秒曝光約為平均值。可以利用多次曝光同時可視化熒光金和另一種示蹤劑。因此，UV將與亮場照射相結合，以在放射自顯影中同時定位熒光金與HRP或銀顆粒。類似地，藍光激發可以組合起來，也可以可視化FITC的綠色發射顏色，而綠色激發光可以用于同時觀察碘化丙啶或溴化乙錠（熒光復染劑）的紅色發射顏色。

Fluorochrome熒光金（FC10000）其他信息：

對于通過微量注射器或微量移液管進行的壓力注射，Fluoro Gold應溶解在蒸餾水中或0.9%鹽水中。氟金也可用作2M中性磷酸鹽緩沖液中的懸浮液，然而，懸浮顆粒可能會堵塞細的微量移液管尖-端，因此蒸餾水或0.9%鹽水是首-選載體。對于離子電滲療法，1%的氟金溶液在1M乙酸緩沖液（pH=3.3）中配制。清潔良好（95%ETOH，水）的玻璃微量移液管尖-端應為10-20µm。最佳的離子電滲參數是在10-20分鐘內用脈沖電流（4-10秒開啟，4-10秒關閉）輸送+1至+5u安培。

實際上，任何中樞或外周神經系統結構都可以注射Fluoro Gold進行逆行轉運分析。在外周神經系統中，可以研究神經節和外周目標。對于周圍神經的研究，應切斷或損傷神經，并浸入或注射aq。5%氟金溶液。由于Fluoro Gold不會被完整的通過纖維顯著吸收，因此纖維必須被切割或嚴重損壞才能吸收染料。

運輸和生存時間

熒光金被用作逆行軸突示蹤劑，盡管確實發生了正向軸突運輸。應改變存活時間（特別是12小時-2天的短存活時間），以最大限度地提高所研究的特定神經元系統中的正遷移。對于逆行運輸，存活時間應從4天到14天不等。大多數系統需要7到10天的時間，盡管長路徑（如脊髓到腦干）和大型哺乳動物（如貓、猴子）的路徑可能需要更長的生存時間（如14天）。此外，由于熒光金在逆行標記神經元內保持快速，幾個月的存活時間也將產生極-好的結果。對于離子電滲療法，建議2-5天的存活時間。據估計，哺乳動物每天的運輸量約為2厘米；冷氣球慢一點