光譜分析中,常用到比色皿進行定量和定性分析。一旦比色皿選擇、使用、清洗不當,便可能造成實驗誤差等不良后果。
比色皿分類
比色皿,又名吸收池、樣品池,用于盛放參比液、樣品液。配套在光譜分析儀器上,如分光光度計,血線蛋白分析儀,粒度分析儀等。
比色皿按使用的波長范圍可分為三大系列:可見光系列(稱:玻璃比色皿);紫外可見光系列(稱:石英比色皿);紅外光系列(稱:紅外比色皿)。
比色皿選擇
玻璃比色皿只能用于可見光區,適用于330~1000nm 波長范圍。
石英比色皿既適用于紫外光區,也可用于可見光區,適用于200~400nm波長范圍。
由于玻璃比色皿的價格遠遠低于石英比色皿,通常選擇可見光區使用玻璃比色皿,紫外光區使用石英比色皿。
比色皿使用
在使用比色皿時,兩個透光面要*平行,并垂直置于比色皿架中,以保證在測量時,入射光垂直于透光面,避免光的反射損失,保證光程固定。
比色皿一般為長方體,其底及兩側為磨毛玻璃,另兩面為光學玻璃制成的透光面采用熔融一體、玻璃粉高溫燒結和膠粘合而成。所以使用時應注意以下幾點:
◇ 拿取比色皿時,只能用手指接觸兩側的毛玻璃,避免接觸光學面,用力不可過大。同時注意輕拿輕放,防止破損。
◇ 比色皿中不應長期盛放含有腐蝕玻璃物質的溶液。
◇ 比色皿高溫后易爆裂,因此不應放在火焰或電爐上加熱或干燥箱內烘烤。
◇ 比色皿的透光面不應與硬物或臟物接觸。比色皿使用時請勿碰撞。
◇ 盛裝溶液時,高度應為比色皿的2 /3 處,光學面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附,然后再用鏡頭紙或絲綢順著同一方向擦拭。
◇ 在測量時如對比色皿有懷疑,可自行檢測??蓪⒉ㄩL選擇在實際使用的波長上,將一套比色皿都注入蒸餾水,將其中一只的透射比調至95%(數顯儀器調至100%)處,測量其它各只的透射比,凡透射比之差不大于0.5%即可配套使用。
比色皿誤差規避
?、俦壬蟮耐腹饷娌粦c硬物或臟物接觸,比色皿使用時勿碰撞。
?、诒壬笾械囊后w,應沿毛面傾斜,慢慢倒掉,不要將比色皿翻轉,直接口向下放在干凈的濾紙上吸干剩余液,然后用蒸餾水沖洗比色皿內部倒掉(操作同上)避免液體外流,使第2次測量時不用擦拭比色皿,不致因擦拭帶來的誤差。
?、郾壬皩⒏鱾€比色皿中裝入蒸餾水,在比色波長下進行比較,誤差在±0.001吸光度以內的比色皿選出4-8個進行比色測定,可避免因比色皿差異造成測量誤差。
?、苡猛昙辞逑?,清洗后在通風陰涼處干燥,等*干燥后放入相應裝具中。放置時,裝具保持清潔干燥,比色皿應秉承“光面朝上,毛面在兩側”的原則,這樣便于抓取兩毛面拿出使用,不易弄污光面。
比色皿清洗
分光光度法中比色皿潔凈與否是影響測定準確度的因素之一。因此,比色皿必須保持清潔和無傷痕,選擇正確的洗凈方法。
清洗液
比色皿清洗液:
濃鹽酸:甲醇:水=1:4:3
如果比色皿被有機物污染,宜用鹽酸—乙醇(1:2)混合液浸洗,也可用相應的有機溶劑如醇醚混合物浸泡洗滌。如:油脂污染可用石油醚浸洗,鉻天青顯色劑污染可用硝酸(1:2)浸洗等。
也可用冷的或溫熱的(40~50℃)陰離子表面活性劑的碳酸鈉溶液(2%)浸泡,可加熱10分鐘左右。對于有色物質的污染可用HCL(3mol/L)-乙醇(1+1)溶液洗滌。
有色物質污染的比色皿用鹽酸:乙醇(1:2)浸泡一段時間,顏色就去掉了。
清洗步驟
?、?比色皿用完后應當先用適當溶劑沖洗,注意里外都要洗到。如果溶劑無毒的話,可以裝入一半溶劑后,用手指按住比色皿的兩端,用力搖晃,次數應當是不少于三次。
?、?然后用大量的自來水沖洗,這一步對水溶液和鹽溶液非常重要。當然如果所用溶劑不親水這步可以放棄。
③ 最后再用去離子水清洗,注意里外都要洗到,如果溶劑不親水的這一步也可放棄。
?、?洗完后不要刻意的將比色皿擦干,需放在比色皿盒內,不用蓋上讓其自然揮干。