問題大全:ELISA試劑盒檢測不成功的原因
elisa試劑盒即酶聯免疫吸附試驗,它是一種常用的固相酶免疫測定辦法,由于ELISA辦法靈敏,特異性強不需要特殊設備,所以被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因 素較多,并且其操作中有必定的技能要求,在臨床查驗中除正常反響外,有時常可見到一些錯誤效果!
溶血標本及混有紅細胞的血清選用ELISA法檢測易產生假陽性。或許是溶血血清中含有過 氧化酶物質,在洗滌過程中往往難以洗脫,它可使 H2O2釋放出原生態氧(O),然后催化底物四甲基聯ben胺生成可溶性的有色物質,即顯藍色, 產生假陽性.標本受細菌污染。因菌體中或許含有內源性辣根過氧化物酶,因而,被細菌污染的標本同 溶血標本一樣,亦可產生非特異性顯色而攪擾測定效果。
標本保存不妥。在冰箱中保存過久的標本,在間接法ELISA測定中會導致本底過深、形成 假陽性;為打敗上述攪擾,ELISA試劑盒測定的血清標本宜為新鮮搜集;如不能當即測定,5 d 內測定的血清標本可存放于4℃,1周后測定的血清標本應低溫凍存;凍存后融解的標本,蛋白 質部分濃縮,分布不均,應充分混合后再測定,但混勻時應輕柔,不行激烈振動。
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