古朵教您如何避免ELISA實驗中的基質效應?

　　在ELISA試劑盒實驗的時候，我們經常會遇到樣品濃度挨近試劑盒的靈敏度，容易發生樣本OD450值低于空白值的現象，特別是在血清和血漿樣本中。這就有可能是基質效應導致的結果。

　　什么是基質效應呢?

　　首先我們要知道什么是基質，基質是指樣品中目標分析物以外的部分。由于基質成分會對分析過程有顯著干擾，影響分析結果的準確性。業內把這些影響統稱為基質效應。這是ELISA試劑盒開發和使用中需要避開的雷。

　　如何判斷是否是基質效應呢?

　　當單個樣本或少量樣本值低于空白值時，可能是實驗操作出現問題，這時應增加重復，進步操作技術。當許多樣本都低于空白值時，應思考基質效應的影響，建立校正曲線予以修改。基質效應的原因錯綜復雜，有可能是樣品中存在的基質導致原抗體的聯絡結合能力下降，便產生了樣本值低于空白值的現象。導致樣本值無法計算出數值，或許數值為負。

　　雖然原因復雜，但有方法可以用來評估基質效應。

　　第一種方法是采用線性稀釋，一般來講，抗原和捕獲抗體、檢測抗體之間的結合作用很強，樣品濃度被稀釋并不影響它們的結合，而造成基質效應的非特異結合的力要弱很多，如果不斷稀釋樣品，非特異結合造成的干擾會逐步減少，測量值也更接近真實值。沒有基質效應時，無論如何稀釋，測量值都和真實值吻合。而有基質效應時，稀釋會造成非特異性結合比例的減少，測量值也相應地產生很大改變。

　　第二種方法是摻入回收率實驗，將低、中和高濃度的分析物摻入到已測定過濃度的樣本中，摻入前后實測到的濃度增加部分與摻入濃度之比就是回收率，回收率以百分比的形式呈現。回收率介于80-120%，才符合標準。

　　那我們如何避免ELISA試劑盒實驗中基質效應?

　　基質效應可以通過產品研發階段的優化盡可能去消除的。

　　ELISA試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。