ELISA實(shí)驗(yàn)丨試劑盒操作—數(shù)據(jù)分析與標(biāo)曲擬合

　　做完ELISA實(shí)驗(yàn)，測(cè)完吸光度，數(shù)據(jù)怎么處理?標(biāo)準(zhǔn)曲線不是直線怎么辦?古朵生物技術(shù)小編整理了ELISA數(shù)據(jù)處理相關(guān)知識(shí)，希望對(duì)您有幫助。

　　一、ELISA 標(biāo)準(zhǔn)曲線分析步驟

　　標(biāo)曲和樣本孔的每個(gè)孔 450nm 的OD值減去630nm(或570nm)的OD值;

　　再將獲得的標(biāo)曲和樣本孔數(shù)據(jù)分別減去空白孔Blank的OD值;

　　以標(biāo)曲的濃度為橫坐標(biāo)，以上算出的OD值為縱坐標(biāo)，擬合標(biāo)曲(選擇R2值大于0.99的比較好的擬合方式，必要時(shí)可以刪除個(gè)別差異較大的標(biāo)曲點(diǎn)進(jìn)行擬合);

　　計(jì)算樣本值，將樣本減去空白孔的OD值復(fù)制，選軟件中的“粘貼"，得到的X值再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)就是最終的濃度值。

　　二、ELISA 標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合方程

　　直線回歸：直線回歸是最基本、簡(jiǎn)單的回歸分析方法，將所有的測(cè)試點(diǎn)擬合為一條直線，其擬合函數(shù)方程式為：y = a + bx。一般實(shí)際實(shí)驗(yàn)中線性的情況下直線回歸可以獲得較為理想的R2值，如果直線擬合不理想，可以考慮三次曲線、logistic曲線(四參數(shù))等。

　　logistic曲線(四參數(shù))擬合回歸方程：競(jìng)爭(zhēng)法和夾心法都可以用到。它要求X值不能小于0(因?yàn)橹笖?shù)是實(shí)數(shù),故有此要求)。在很多情況下它都可以擬合ELISA的反應(yīng)曲線,所以它也成了ELISA中應(yīng)用的模型之一。

　　注：曲線擬合方法雖多，要根據(jù)不同類型ELISA本身的特點(diǎn)，選擇適合的曲線擬合模型，才能得到合理的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。一般情況下，需要綜合考慮標(biāo)準(zhǔn)曲線的趨勢(shì)走向以及R2值的大小以及樣本落值情況。

　　ELISA試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。