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人皰疹病毒（HHV）核酸檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

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PCR檢測(cè)試劑盒

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上海博湖生物科技有限公司

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人皰疹病毒（HHV）核酸檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。使用本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照時(shí)，由于其濃度較高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專(zhuān)門(mén)的區(qū)域操作。

詳細(xì)介紹

規(guī)格及成分：
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見(jiàn)下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集：
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌具體操作按所用儀器*的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時(shí)，大吸收光譜在 471nm，結(jié)合 DNA 時(shí)的大吸收光譜在 500nm，大發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
鸚鵡熱衣原體PCR試劑盒品牌以 Cps 陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品濃度的 log 為橫軸，以 Ct 值為縱軸，通過(guò)待測(cè)樣品的 Ct 值計(jì)算出樣品 DNA 的濃度。
產(chǎn)品名稱(chēng)：人皰疹病毒(HHV)核酸檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
規(guī)格：48T/盒
編號(hào)：BH-P4808
分類(lèi)：熒光-PCR法
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
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規(guī)格及成分：
產(chǎn)品名稱(chēng)成分編號(hào) 十孔盒包裝
MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶-RI 混合液 101105A 20 μL
MMLV Buffer-dNTP 混合液 101105B 60 μL
微量核酸沉淀劑 50903 400 μL
TdT（末端轉(zhuǎn)移酶） 120312 10 μL
2×TdT Buffer（含 dATP） 101105 200 μL
PCR MagicMix 3.0（含染料） 90805B 1mL×2
5′-RACE 引物 A-引物 B 混合液 yw373374 200 μL
5′-RACE 引物 C yw375 200 μL
RNase-Free 水 80403 1 mL
使用手冊(cè) 101105sc 1 份
TNFSF10 Protein Mouse 重組小鼠 TNFSF10 / AIL / APO-2L 蛋白 (aa 118-291, His 標(biāo)簽)*質(zhì)量規(guī)格：>98%,USPDipyridamole

人肝間充質(zhì)干細(xì)胞(肝)(HMSC-HE)(5×105) HGC-27人胃癌細(xì)胞 Human他米巴羅汀質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%Tamibarotene

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM9402分子篩3A(干燥劑用)質(zhì)量規(guī)格：干燥劑用Molecular sieves, 3 Å

人齒根膜韌帶成纖維細(xì)胞(HPDLF)( 5×105 )分子篩3A(pellets,3-5 mm)質(zhì)量規(guī)格：pellets,3-5 mmMolecular sieves, 3 Å

CL-0406NCI-H838(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2分子篩3A(pellets,2-3 mm)質(zhì)量規(guī)格：pellets,2-3 mmMolecular sieves, 3 Å
RWPE-2(人前列腺正常細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2*相關(guān)化合物BFamotidine Related Compound B質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

HBZY-1(大鼠腎小球系膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0369IR983F(大鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1*-乙氧基-2-13CPhenacetin-ethoxy-2-13C質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

人尿道上皮細(xì)胞RNAHUC miRNA5 μg*-乙氧基-1-13CPhenacetin-ethoxy-1-13C質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

FLT3LG Others Mouse 小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氟西汀Fluoxetine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL元*Meta Fluoxetine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
人皰疹病毒(HHV)核酸檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)MS4A1 Others Human 人 CD20 / MS4A1 (aa 213-297) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4-(2-乙基)本磺酰錄shēng huà shì jì容量：RT100克

大鼠表皮色素細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL偏釩酸鈉 Sodium metavanadate dihydrate 16519-65-6 100G 通用試劑

LLC-MK2恒河猴腎細(xì)胞 Ganges RIver LLC-MK2 monkey kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS愈創(chuàng)木膠;愈創(chuàng)木脂 GuM gucicci;GuM gucicc;Rqsin gucicc;Gucicc; 9000/9/7

IFNA4 Protein Human 重組人 IFNα4 / IFNa4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (His 標(biāo)簽)L-Cysteinemetxylesterxy7nochlorideL-鹽酸半胱酸25克BR，99%

MDA-MB-175VII(人導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 BRL 3A(大鼠肝細(xì)胞)1271-42-7二茂鐵Ferrocenecarboxylic acid
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)*，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。