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廣州市愛測智能科技有限公司
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更新時間：2022-12-28 20:32:07瀏覽次數(shù)：382次
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LSM淋巴細(xì)胞分離液，從去纖維蛋白或肝素化的全血中分離淋巴細(xì)胞，用于體外分離外周血淋巴細(xì)胞，也可以從其他來源中分離單核細(xì)胞，包括臍帶血細(xì)胞和骨髓細(xì)胞。
產(chǎn)品特點：
MP Biomedicals對Boyum的提取配方進(jìn)行了改良，在淋巴細(xì)胞分離液LSM中成功地運用sodium diatrizoate替代了sodium metrizoate。LSM(sterile-filtered) 溶液密度1.077-1.080g/ml(20℃) 。僅需一步離心操作便能高效地回收淋巴細(xì)胞。
工作原理：
去纖維蛋白或肝素化人血以1：1的比例用生理鹽水或稀釋，在分離溶液中分層，低速離心30min。離心過程中，由于差速遷移最終形成不同的細(xì)胞層。聚集在管底的顆粒主要是紅細(xì)胞和多形核粒細(xì)胞，它們通過梯度遷移至管底。由于其密度不同，淋巴細(xì)胞和其他單個核細(xì)胞（單核細(xì)胞和血小板）分布在血漿和LSM兩層之間。淋巴細(xì)胞可以通過吸取分界層溶液回收，最后進(jìn)一步清洗去除血小板，LSM和血漿。
使用方法：
1. 輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合
2. 無菌轉(zhuǎn)移3 ml LSM到15 ml離心管中。
3. 混合2 ml去纖維蛋白血液或肝素化血液和2 ml 生理鹽水
4. 仔細(xì)的將稀釋血液加入含有3 ml LSM（室溫）的15ml離心管中，在血液和LSM中形成一個明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中。
5. 室溫下400xg離心15-30min，離心可以沉淀紅細(xì)胞和多形核白細(xì)胞，同時可以在LSM上形成一層單核淋巴細(xì)胞，如上圖所示（具體分層情況為血漿層-單個核細(xì)胞層-LSM層-RBC顆粒）。
6. 吸出淋巴細(xì)胞上方2-3mm的血漿。
7. 吸取淋巴細(xì)胞層以及它下面一半的LSM，并轉(zhuǎn)移到另外一個離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至離心管內(nèi)的淋巴細(xì)胞層中，室溫（18-25°C）離心10分鐘，離心速度設(shè)定在既不損傷細(xì)胞又能沉淀細(xì)胞即刻，例如160 – 260 xg（清洗去除LSM，并降低血小板的百分比）。
8. 再用平衡鹽緩沖液清洗細(xì)胞，最后用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基重懸細(xì)胞。
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