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外切酶

時(shí)間:2011/4/11閱讀:1407
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外切酶

 即核酸外切酶(exonuclease )。  核酸外切酶是一類能從多核苷酸鏈的一端開始按序催化水解3、5-磷酸二酯鍵,降解核苷酸的酶。其水解的zui終產(chǎn)物是單個(gè)的核苷酸(DNA為dNTP,RNA為NTP) ...... 即核酸(exonuclease )。
  核酸是一類能從多核苷酸鏈的一端開始按序催化水解3、5-磷酸二酯鍵,降解核苷酸的酶。其水解的zui終產(chǎn)物是單個(gè)的核苷酸(DNA為dNTP,RNA為NTP)。按作用的特性差異可以將其分為單鏈的核酸和雙鏈的核酸。
  單鏈的核酸包括大腸桿菌核酸Ⅰ(exoⅠ)和核酸Ⅶ(exoⅦ)。核酸Ⅶ(exoⅦ)能夠從5′-末端或3′-末端呈單鏈狀態(tài)的DNA分子上降解DNA,產(chǎn)生出寡核苷酸短片段,而且是*不需要Mg2+離子的活性酶,是一種耐受性很強(qiáng)的核酸酶。核酸Ⅶ(exoⅦ)可以用來(lái)測(cè)定基因組DNA中一些特殊的間隔序列和編碼序列的位置。它只切割末端有單鏈突出的DNA分子。
  雙鏈的核酸包括大腸桿菌核酸Ⅲ(exoⅢ)、λ噬菌體核酸(λexo)以及T7噬菌體基因6核酸等。大腸桿菌核酸Ⅲ(exo Ⅲ)具有多種催化功能,可以降解雙鏈DNA分子中的許多類型的磷酸二酯鍵。其中主要的催化活性是催化雙鏈DNA按3′→5′的方向從3′-OH末端釋放5′-單核苷酸。大腸桿菌核酸Ⅲ(exoⅢ)通過(guò)其3′→5′活性使雙鏈DNA分子產(chǎn)生出單鏈區(qū),經(jīng)過(guò)這種修飾的DNA再配合使用Klenow酶,同時(shí)加進(jìn)帶放射性同位素的核苷酸,便可以制備特異性的放射性探針。
  λ噬菌體核酸(λexo)zui初是從感染了λ噬菌體的大腸桿菌細(xì)胞中純化出來(lái)的。這種酶催化雙鏈DNA分子從5′-P末端進(jìn)行逐步的水解釋放出5′-單核苷酸。但不能降解5′-OH末端。

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