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產品包裝 | 液體盒裝 | 檢測方法 | 分光光度法 |
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應用范圍 | 僅供科研使用 | 保存條件 | 低溫避光保存 |
甲醛脫氫酶(FDH)檢測試劑盒(輔酶Ⅰ類)
產品規格 : 50T/48S
質量標準:企業標準
測試方法:分光光度法
產品包裝:液體盒裝
運輸條件:快遞包郵
應用范圍:僅供科研研究使用
保存條件:低溫避光保存
供 應 商: 上海紀寧實業有限公司
注 意: 正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
甲醛是一種能與蛋白質、核酸和脂類產生非特異性反應的活潑化合物,對所有生物都具有很高毒性。甲醛脫氫酶作為含鋅中等鏈醇脫氫酶(ADH)的家庭成員之一,廣泛存在于原核和真核生物中,該酶能利用NAD+作為輔酶,將有毒的甲醛氧化,是甲醛氧化途徑中的關鍵酶。
測定原理:
甲醛脫氫酶催化甲醛和NAD+產生NADH,在340nm處的吸光值會增加,測定340nm處的吸光值變化,可計算得到甲醛脫氫酶的活性。
自備實驗用品及儀器:
天平、離心機、分光光度計、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體30mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入15mL水溶解待用,用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入3mL水溶解待用。
試劑四:液體3mL×1瓶,4℃避光保存。
FDH提取:
1.組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進行冰浴勻漿,然后10000g,4℃,離心20min。
2.細胞:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。
3.液體:直接檢測。
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