細(xì)胞簡介：

小鼠腸黏膜上皮分離自腸道組織；腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中長的一段，也是功能重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的，大腸主要濃縮食物殘?jiān)?，形成糞便，再通過直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分，其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機(jī)體面對病原微生物的道防線。因此，腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞，在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強(qiáng)度。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸黏膜上皮采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠白介素28A(IL-28A)試劑盒 ，英文名： IL-28A ELISA Kit

Mouse ierleukin 9 (IL-9) ELISA Kit 小鼠白介素9(IL-9)試劑盒

ELISA 小鼠IgA(mouse IgA)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforILK-1(Humaniegrin-linkedkinase1)ELISAKit人整合素連接激酶1

通用型胱(cystine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次

ELISAKitOSM大鼠抑瘤素M

小鼠表皮生長因子(mouse EGF)   作用：   ELISA 

小鼠表皮生長因子受體(mouse EGF R)   作用：   ELISA 

小鼠內(nèi)皮素-1(mouse Endothelin-1)   作用：   ELISA 

小鼠噬酸性粒細(xì)胞趨化因子(mouse Eotaxin)   作用：   ELISA

CD13重組兔單克隆抗體

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human epithelial neuophil activating peptide 78 (ENA-78/CXCL5) ELISA Kit 人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)試劑盒

HumanleukocyteaigenA,HLA-AELISAKit 人類白細(xì)胞抗原A(HLA-A)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-hepatitisAvirusIgGaibody,ai-HAV試劑盒人抗甲型肝病毒IgG抗體(ai-HAV)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物0酸葡萄糖變位酶(phosphoglucomase;PGM)活性光譜法定量試劑盒20次

Humanvimein,VIMELISAKit人波形蛋白(VIM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

內(nèi)皮分化相關(guān)因子1抗體

EPCAM重組食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta 0.5mgIL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白介素1β(白細(xì)胞介素-1β)(多肽抗原)

CSNK1A1重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

EPHA3 Protein Human 重組人 EphA3 蛋白

CD84 Protein Mouse 重組小鼠 CD84 蛋白

小鼠腸黏膜上皮細(xì)胞IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta 0.5mgIL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白介素1β(白細(xì)胞介素-1β)(多肽抗原)

EPHA3 Protein Human 重組人 EphA3 蛋白

EPCAM重組食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD84 Protein Mouse 重組小鼠 CD84 蛋白

CSNK1A1重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein