細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細胞簡介：

小鼠小腸平滑肌分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的，因為食物經(jīng)過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后，基本上完成了消化過程，同時營養(yǎng)物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環(huán)形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切；構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能，其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力，促使食物向下運動。小腸平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。小腸平滑肌肉瘤是起源于小腸壁肌層、黏膜下肌層和腸壁血管平滑肌的惡性腫瘤，是小腸結締組織惡性腫瘤中常見的一種。因此，體外小腸平滑肌細胞的培養(yǎng)對研究小腸平滑肌肉瘤提供了基礎和前提。此外，體外培養(yǎng)細胞，由于影響因素較為單一，是研究細胞功能以及相應的細胞信號轉導機制的基礎。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠小腸平滑肌采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠腸平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠白介素28B(IL-28B)試劑盒 ，英文名： IL-28B ELISA Kit

Mouse ierleukin 8 (IL-8/CXCL8) ELISA Kit 小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒

ELISA 小鼠類胰島素生長因子結合蛋白-3(mouse IGBPF-3)  進口分裝

CLIAKitforIMA(HumanIschemiaModifiedAlbumin)ELISAKit人缺血修飾白蛋白

通用型胱(cystine)含量比色法定量試劑盒20次

ELISAKitINH-B大鼠抑制素B

小鼠半乳糖凝集素-9(mouse Galectin-9)   作用：   ELISA 

小鼠胃泌素(mouse Gasin)   作用：   ELISA 

小鼠Ghrelin(mouse Ghrelin)   作用：   ELISA 

小鼠胰高血糖素樣肽-1(mouse GLP-1)   作用：   ELISA

B淋巴細胞酪激酶抗體

小鼠基質金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human neuraminidase (NA) ELISA Kit 人神經(jīng)酶(NA)試劑盒

HumanleukocyteaigenE,HLA-EELISAKit 人類白細胞抗原E(HLA-E)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-hepatitisAvirusIgMaibody,ai-HAV試劑盒人抗甲型肝病毒IgM抗體(ai-HAV)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物0酸葡萄糖酸脫氫酶(phosphogluconatedehydrogenase;PGD)電泳分析試劑盒5次

Humanverylowdensitylipoproteieceptor,VLDLRELISAKit人極低密度脂蛋白受體(VLDLR)試劑盒規(guī)格：96T/48T

腦膠質瘤相關蛋白抗體（鋅指蛋白5）

IL21R重組大鼠 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白 Protein

Ghrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽 0.5mgGhrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽)多肽抗原

KLK8重組人 KLK-8 / Kallikrein-8 蛋白 Protein

EPHA4 Protein Human 重組人 EphA4 / HEK8 蛋白 (aa 570-986, His & GST 標簽)

FLT4 Protein Mouse 重組小鼠 VEGFR3 / FLT-4 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)

小鼠腸平滑肌細胞Ghrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽 0.5mgGhrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽)多肽抗原

EPHA4 Protein Human 重組人 EphA4 / HEK8 蛋白 (aa 570-986, His & GST 標簽)

IL21R重組大鼠 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白 Protein

FLT4 Protein Mouse 重組小鼠 VEGFR3 / FLT-4 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)

KLK8重組人 KLK-8 / Kallikrein-8 蛋白 Protein

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取