細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞簡介：

小鼠結腸黏膜上皮分離自結腸組織；結腸在右髂窩內續于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部分，大部分固定于腹后壁，結腸的排列酷似英文字母“M"，將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為：黏膜（上皮層、固有層、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結締組織），肌層（內環形、外縱行兩層平滑肌），外膜（纖維膜或漿膜）。腸黏膜上皮細胞是機體內外環境的重要屏障，持續暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的道防線。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞，在黏膜免疫反應的起始階段發揮關鍵作用，它決定黏膜免疫反應的發生、性質和強度。探討正常結腸黏膜上皮細胞的分離、體外培養方法，為研究腸黏膜上皮細胞以及與腸黏膜相關疾病建立合適的細胞模型。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠結腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠結腸黏膜上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

公司正在出售的產品：

大鼠酶Ⅸ(CA9)試劑盒 ，英文名： CA9 ELISA Kit

Mouse glycated hemoglobin A1c (GHbA1c) ELISA Kit 小鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)試劑盒

RatCoisolELISAKit 大鼠(Coisol)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforHLA-G(HumanleukocyteaigenG)ELISAKit人類白細胞抗原G

細胞PKD2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitC-Peptide大鼠C肽

小鼠8-羥基脫氧8-OHdG鳥苷酸(mouse 8-OHdG)   作用：   ELISA 

小鼠食欲素A(mouse Orexin A)   作用：   ELISA 

小鼠氧化低密度脂蛋白(mouse OxLDL)   作用：   ELISA 

小鼠抑瘤素mouse  M(mouse OSM)   作用：   ELISA

MFSD2B蛋白抗體

小鼠干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA 試劑盒

Human aquaporin 3 (AQP-3) ELISA Kit 人水通道蛋白3(AQP-3)試劑盒

HumancoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit 人Ⅱ(FⅡ)試劑盒 進口分裝

HumanApelin36,AP12試劑盒人Apelin36(AP36)試劑盒

植物氧化應激活性氧(ROS)熒光測定試劑盒(單線態氧氣)20次

Humaotalbileacide,TBAELISAKit人總膽汁酸(TBA)試劑盒

降鈣素抗體

CD40LG重組小鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白  Protein

成纖維細胞生長因子23(FGF23)重組蛋白 Recombinant Fibroblast Growth Factor 23 (FGF23)

PTPN12重組人 PTPN12 蛋白 Protein

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標簽), Biotinylated

PDCD1LG2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白

小鼠結腸黏膜上皮細胞成纖維細胞生長因子23(FGF23)重組蛋白 Recombinant Fibroblast Growth Factor 23 (FGF23)

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標簽), Biotinylated

CD40LG重組小鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白  Protein

PDCD1LG2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白

PTPN12重組人 PTPN12 蛋白 Protein

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取