細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞簡介：

小鼠腎成纖維分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物，同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質，如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調節水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內環境的穩定，使新陳代謝得以正常進行。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損以及骨創傷的修復有著十分重要的作用。腎成纖維細胞是腎臟結締組織中重要的細胞類型，在體外培養中，一般大致成梭形、多角形或不規則形等，為貼壁生長型細胞。剛分離的腎成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。其主要功能有：①組成過濾屏障內壁的重要部分；②在炎癥和致血栓物質的刺激合成必要的生物活性分子；③受損后影響系膜細胞和上皮細胞，進而影響腎臟病變。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠腎成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠腎成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

公司正在出售的產品：

大鼠亞鐵螯合酶(FECH)試劑盒 ，英文名： FECH ELISA Kit

Mouse coagulation factor II (F II) ELISA Kit 小鼠Ⅱ(FⅡ)試劑盒

Mousebasicfibroblastgrowthfactor4,bFGF-4ELISAKit 小鼠堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforHumanCollectinELISAKit人膠原凝集素

細胞CDK1/CYCLINB激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitu-T4大鼠高敏甲狀腺素

兔子細胞間粘附分子2試劑盒   兔子細胞間粘附分子2試劑盒   規格型號：96T/48T   兔子細胞間粘附分子2試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子細胞間粘附分子2試劑盒、兔子細胞間粘附分子2eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

兔子細胞間粘附分子1試劑盒   兔子細胞間粘附分子1試劑盒   規格型號：96T/48T   兔子細胞間粘附分子1試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子細胞間粘附分子1試劑盒、兔子細胞間粘附分子1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

兔子脫氧酚試劑盒   兔子脫氧酚試劑盒   規格型號：96T/48T   兔子脫氧酚試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子脫氧酚試劑盒、兔子脫氧酚eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

豬氧化酶試劑盒   豬氧化酶試劑盒   規格型號：96T/48T   豬氧化酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：豬氧化酶試劑盒、豬氧化酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

內質網氧化物蛋白Ero1-Lα抗體

小鼠標志物(CA724)ELISA 試劑盒

Human ai myocardial aibody (EMAb) ELISA Kit 人抗眼肌抗體(EMAb)試劑盒

HumanglathioneS-ansferases,GSTsELISAKit 人S轉移酶(GSTs)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforABM-Ab(Humanalveolibasememembranezoneaibody)ELISAKit人抗肺泡基底膜抗體

伊紅復染試劑盒50次

Mouseniicoxide,NOELISAKit小鼠(NO)試劑盒

腫瘤壞死因子受體相關因子6抗體

PECAM1重組小鼠 CD31 / PECAM-1 蛋白 (His 標簽) Protein

BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor 0.5mgBDNF (Brain-derived Neurotrophin factor) 腦源神經營養因子(腦衍化神經營養因子)(多肽片斷抗原)

IGF1重組人 IGF1 / IGF-I 蛋白 Protein

GADD45A Protein Human 重組人 GADD45A / DDIT-1 蛋白 (His & GST 標簽)

TNFSF12 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF12 蛋白

小鼠腎成纖維細胞BDNF (Brain-derived Neurotrophin factor 0.5mgBDNF (Brain-derived Neurotrophin factor) 腦源神經營養因子(腦衍化神經營養因子)(多肽片斷抗原)

GADD45A Protein Human 重組人 GADD45A / DDIT-1 蛋白 (His & GST 標簽)

PECAM1重組小鼠 CD31 / PECAM-1 蛋白 (His 標簽) Protein

TNFSF12 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF12 蛋白

IGF1重組人 IGF1 / IGF-I 蛋白 Protein

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取