細胞傳代步驟：

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞簡介：

小鼠牙周膜成纖維分離自牙周膜組織；牙周膜（牙周韌帶、牙周間隙）是由致密結締組織所構成。多數纖維排列成束，纖維的一端埋于牙骨質內，另一端則埋于牙槽窩骨壁里，使牙齒固位于牙槽窩內；牙周膜內有神經、血管、淋巴和上皮細胞等。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的牙周膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。牙周膜成纖維細胞（PLFs）作為牙周膜的主體細胞，是牙周膜主要的間質細胞，它不僅具有合成膠原、基質、彈力纖維和糖蛋白的功能，還有吸收膠原吞噬異物的能力，還參與了牙周組織的病變、修復及再生過程。現在，利用牙周膜細胞建立體外模型，已經成為有關員研究牙周組織疾病的重要手段。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠牙周膜成纖維采用膠原酶-聯合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠牙周膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞復蘇步驟:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

公司正在出售的產品：

大鼠組織轉谷酰胺酶(TGM2)試劑盒 ，英文名： TGM2 ELISA Kit

Mouse ai alpha fodrin aibody IgG/IgA (-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit 小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)試劑盒

MousehepatitisBviruseaigen,HBeAgELISAKit 小鼠乙型肝e抗原(HBeAg)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanmembranecofactorprotein,MCPELISAKit人膜輔蛋白

透射電鏡(TEM)通用載網組織樣品陰性染色試劑盒20次

ELISAKitsP-selectin大鼠可溶性P選擇素

兔型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒   96T/48T

兔型纖溶酶原激活物(uPA)試劑盒   96T/48T

兔內皮型合成酶(eNOS)試劑盒   96T/48T

兔內皮素（Endothelin-1）試劑盒   96T/48T

肺Kruppel樣因子抗體

小鼠P21蛋白(P21)試劑盒 96T/48T

Rat glycogen phosphorylase isoenzyme II (GP-II) ELISA Kit 大鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)試劑盒

HumanFreeTestoterone,F-TESTOELISAKit 人游離睪酮(F-TESTO)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumancoagulationfactorⅩⅢ,FⅩⅢ試劑盒人ⅩⅢ(FⅩⅢ)試劑盒規格：96T/48T

組蛋白轉甲基酶活性試劑盒(H3-K9)20次

HumaeninELISAKit人腎素(Renin)試劑盒規格：96T/48T

軟骨肉瘤相關蛋白1抗體

KLK13重組人 KLK13 / Kallikrein-13 蛋白 Protein

胎盤堿性0酸酶(ALPP)重組蛋白 Recombinant Alkaline Phosphatase, Placental (ALPP)

SEMA3A重組人 Semaphorin 3A / SEMA3A 蛋白 (Fc 標簽) Protein

HIST1H3A Protein Human 重組人 Histone H3.1 / HIST1H3A / H3FA 蛋白

HA Protein H11N2 重組甲型流感 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

小鼠牙周膜成纖維細胞胎盤堿性0酸酶(ALPP)重組蛋白 Recombinant Alkaline Phosphatase, Placental (ALPP)

HIST1H3A Protein Human 重組人 Histone H3.1 / HIST1H3A / H3FA 蛋白

KLK13重組人 KLK13 / Kallikrein-13 蛋白 Protein

HA Protein H11N2 重組甲型流感 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

SEMA3A重組人 Semaphorin 3A / SEMA3A 蛋白 (Fc 標簽) Protein

細胞凍存步驟:

待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取