細(xì)胞簡介：

小鼠陰道上皮分離自陰道組織；陰道位于膀胱、尿道和直腸之間，是一個(gè)富有彈性的管狀器官。它在人類生殖過程中具有多種生理功能，是連接子宮與外陰的通道，是排出月經(jīng)血、娩出嬰兒的必經(jīng)之路，也是一個(gè)重要的性交器官。陰道壁按組織學(xué)由外到內(nèi)分三層，即黏膜層、肌層和外膜，陰道黏膜是外層，也就是淺表的那一層，相當(dāng)于皮膚的外面層一樣。陰道上皮呈粉紅色，表面為復(fù)層鱗狀上皮，但無角化層。在正常的月經(jīng)周期中，陰道上皮脫落的上皮細(xì)胞的形態(tài)隨著卵巢內(nèi)分泌的變化而改變，因此通過陰道脫落上皮的病理檢查便可以初步判斷卵巢的內(nèi)分泌功能狀況。陰道粘膜是指陰道內(nèi)壁分泌的保持陰道內(nèi)壁表面濕潤，保持表面活力的粘液膜層，因?yàn)槠浔砻娑嗾吵恚蕿檎衬ぁＴ诼雅萜冢幍勒衬な艽萍に刈饔茫掀ぴ龊瘢砥ぜ?xì)胞角化；陰道上皮細(xì)胞內(nèi)糖原豐富（注：陰道粘膜上皮是復(fù)層扁平上皮又名“復(fù)層鱗狀上皮"），在陰道桿菌作用下分解為乳酸，保持陰道的酸性環(huán)境；排卵后，受孕激素作用，陰道粘膜上皮大量脫落，角化現(xiàn)象消失。

方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠陰道上皮采用 - 膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠陰道上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠陰道上皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞???

細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA 試劑盒

Rat aithrombin III (AT- III) aibody ELISA Kit 大鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)試劑盒

HumanOpacity-associatedproteins,OPAsELISAKit 人不透光相關(guān)蛋白(OPAs)試劑盒分裝

HumanAngiotensinconveingenzyme,ACE試劑盒人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)試劑盒

植物高質(zhì)化線粒體分離試劑盒10次

Humanβ-siteAPP-CleavingEnzyme1，1BACE1ELISAKit人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)試劑盒

植物銅鋅超氧化物歧化酶（CuZn-SOD）測(cè)試盒（比色法）

乙酰（ACH）測(cè)定試劑盒（測(cè)血清）（微板法）

總蛋白定量測(cè)定試劑盒（帶標(biāo)準(zhǔn)：BCA法）（微板法）

總蛋白（TP）測(cè)定試劑盒（帶標(biāo)準(zhǔn)：雙縮脲法）

凋亡相關(guān)蛋白3抗體

8號(hào)染色體開放閱讀框58抗體

SELL重組小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

CK14/17/42/10 peptide 細(xì)胞角蛋白14抗原 0.5mgCK14/17/42/10 peptide 細(xì)胞角蛋白14抗原

BCL6重組人 BCL6 / B-cell CLL lymphoma 6 蛋白 (aa 1-150, His & Trx 標(biāo)簽) Protein

ADK Protein Human 重組人 ADK 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

FCGR4 Protein Mouse 重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CK14/17/42/10 peptide 細(xì)胞角蛋白14抗原 0.5mgCK14/17/42/10 peptide 細(xì)胞角蛋白14抗原

ADK Protein Human 重組人 ADK 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

SELL重組小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

FCGR4 Protein Mouse 重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

BCL6重組人 BCL6 / B-cell CLL lymphoma 6 蛋白 (aa 1-150, His & Trx 標(biāo)簽) Protein

小鼠陰道上皮細(xì)胞植物油菜素甾醇(BR)ELISA 試劑盒

Human ai rubella virus IgM aibody (ai-RV IgM) ELISA Kit 人抗風(fēng)疹病毒IgM抗體(ai-RV IgM)試劑盒

Porcinesolublevascuolarcelladhesionmolecules1,sVCAM-1ELISAKit 豬可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒分裝

CLIAKitforAFU(Mousealpha-L-fucosidase)ELISAKit小鼠αL巖藻糖苷酶

血液糖原化學(xué)水解比色法定量試劑盒20次

MouseThyroxineaibody,TAbELISAKit小鼠甲狀腺素抗體(TAb)試劑盒