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elisa檢測(cè)試劑盒校準(zhǔn)曲線的控制:被測(cè)物轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩芤旱姆磻?yīng)稱為顯色反應(yīng)或發(fā)色反應(yīng)。顯色反應(yīng)的介質(zhì)PH條件、顯色劑用量、顯色反應(yīng)的時(shí)間和溫度、為消除共存物干擾而加入的掩蔽劑、甚至加試劑的順序,都要按照方法步驟的要求執(zhí)行。有時(shí),標(biāo)準(zhǔn)系列雖然不像實(shí)際試樣那樣組成復(fù)雜,但仍要求與試樣進(jìn)行同樣的處理步驟,以便控制校準(zhǔn)曲線上的數(shù)據(jù)點(diǎn)的空白、回收率等因素。
建立校準(zhǔn)曲線時(shí),測(cè)量吸光度的參比有兩種選擇。1.用純?nèi)軇┳鲄⒈龋瑑蓚€(gè)比色皿都放溶劑時(shí),“樣品比色皿” 的吸光度測(cè)定值為比色皿成對(duì)性校正值,此后所有樣品吸光度測(cè)定值都須扣除此值,進(jìn)行校正。然后,以純?nèi)軇閰⒈龋瑴y(cè)定空白及標(biāo)準(zhǔn)系列的吸光度,繪制校準(zhǔn)曲線。2.直接用空白為參比。當(dāng)兩個(gè)比色皿都放空白時(shí),測(cè)定比色皿成對(duì)性校正值,然后測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列的吸光度,繪制校準(zhǔn)曲線。兩種方法得到的兩條校準(zhǔn)曲線互相平行,但第一種方法可測(cè)定空白的水平,后一種方法不能測(cè)定空白,理論上校準(zhǔn)曲線通過(guò)原點(diǎn)。elisa檢測(cè)試劑盒若空白為零,兩條校準(zhǔn)曲線重合。無(wú)論用什么作參比,實(shí)樣測(cè)定時(shí)應(yīng)該使用與建立校準(zhǔn)曲線相同的比色皿和同樣的參比。 比色皿的成對(duì)性校正對(duì)于使用已久的比色皿是必要的,尤其是測(cè)量吸光度很小的樣品時(shí),校正可保證測(cè)量值的可靠性和重復(fù)性。
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