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進口ELISA試劑盒實驗原理與步驟

時間:2020/12/9閱讀:474
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進口ELISA試劑盒實驗原理:

進口ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被植物淀粉(Amy)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物淀粉(Amy)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度

進口ELISA試劑盒實驗步驟:

一、準備

1.  原輔料的處理: 根據藥材的有效成分不同,可采用不同的溶劑和方法進行提取,一般多用煎煮法提取有效成分,用等量乙醇精制時放置的時間、回收乙醇后放置的時間可根據實驗安排情況,適當延長,以沉淀*,上清液易于分離為宜。

2.  制顆粒:掌握濕法制粒的操作方法。控制清膏的相對密度時由于量較小,不方便用比重計測量,也可用桑皮紙上測水印的方法適當掌握,以不出現、或僅有少量水印為度;加輔料的量一般不超過清膏量的5倍,以手握之成團,觸之即散即可;如果軟材不易分散,可用乙醇調整干濕度,以降低黏性,易于過篩,并使得顆粒易于干燥。

3.  干燥與整粒:濕顆粒立即在60~80 ℃常壓干燥。整粒后將芳香揮發性物質、對濕熱不穩定的藥物加到干顆粒中。

4.  顆粒劑易吸潮變質,為保證顆粒劑質量,應選擇適宜的包裝材料進行包裝。

二、具體操作

將大清葉,板藍根,連翹,拳參四味,加純化水煎煮2次,每次1.5小時,合并煎液,濾過,濾液濃縮至相對密度約為1.08(90~95 ℃),待冷至室溫,加等量的乙醇使沉淀,靜置;取上清液濃縮至相對密度1.20(60~65 ℃),加等量的水,攪拌,靜置8小時,取上清液濃縮成相對密度為1.38~1.40(60~65 ℃)的清膏。取清膏1份、蔗糖粉3份、糊精1.25份及乙醇適量,制成顆粒,干燥,即得。

進口ELISA試劑盒注意事項:

1.  為使成品純凈,提取液濃縮至相對密度約為1.08加等量的乙醇使沉淀,以除去樹膠,蛋白等雜質,同時便于制粒。

2.  制備的糖粉需600 °C干燥,除去結晶水
 

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