試劑空白吸光度是反映試劑質(zhì)量的指標(biāo)，但不能反映試劑質(zhì)量的全部。試劑成份、純度、用量及穩(wěn)定性，才是保證試劑質(zhì)量的關(guān)鍵所在。目前市售的一些試劑具有抗干擾作用，主要是通過(guò)加入抗干擾物質(zhì)或使用新的色素原以避免內(nèi)源性物質(zhì)的干擾。但值得注意的是：一些試驗(yàn)項(xiàng)目在消除內(nèi)源性物質(zhì)干擾的同時(shí)，會(huì)帶來(lái)樣品含量真實(shí)性的變化。
 

　　每種試劑都有一定的空白吸光度范圍，試劑空白吸光度的改變往往提示該試劑的變質(zhì)；如利用Trinder反應(yīng)為原理的檢測(cè)試劑會(huì)因含酚類物質(zhì)被氧化為醌而變?yōu)榧t色。堿性磷酸酶、r一谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、淀粉酶等檢測(cè)試劑會(huì)因基質(zhì)分解出硝基酚或酚基苯胺而變黃。有些試劑久置后變渾濁。這些情況均可使空白吸光度升高。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶等負(fù)反應(yīng)，在放置過(guò)程中其試劑空白吸光度會(huì)因NADH自行氧化為NAD+而下降。原則上，吸光度上升的反應(yīng)，其試劑空白吸光度越低越好，不能超過(guò)一個(gè)高限；相反，吸光度下降的反應(yīng)，其試劑空白吸光度不能低于一個(gè)低限。因此，試劑空白吸光度限值，常作為程序參數(shù)輸入儀器，如經(jīng)核查超限，儀器會(huì)自動(dòng)報(bào)警，提示更換試劑。需要指出的是，還原型輔酶I(或II)等投料量不足或劣質(zhì)的原料，往往需要加大用量，才使“表觀”吸光度上升，湊合過(guò)試劑空白核對(duì)的“關(guān)”，其后果為如下情況：
 

　　1)、線性范圍變窄 現(xiàn)象：高值測(cè)不高。原因：試劑時(shí)有效成分投料量不足；試劑成份穩(wěn)定性較差。
 

　　2)、靈敏度變低現(xiàn)象：酶促反應(yīng)速度曲線斜率下降，測(cè)定結(jié)果有嚴(yán)重系統(tǒng)誤差。原因：試劑底物濃度不足。
 

　　3)、低值偏高 現(xiàn)象：試劑空白的變化曲線(吸光度VS時(shí)間)明顯波動(dòng)。原因：試劑自身不穩(wěn)定，自行分解；工具酶純度不夠，雜酶含量超限，導(dǎo)致干擾作用。
 

　　丙烯葡聚糖凝膠S-200 HR,Sephacryl S-200 High resolution每種試劑都有一定的空白吸光度范圍，試劑空白吸光度的改變往往提示該試劑的變質(zhì)；如利用Trinder反應(yīng)為原理的檢測(cè)試劑會(huì)因含酚類物質(zhì)被氧化為醌而變?yōu)榧t色。堿性磷酸酶、r一谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、淀粉酶等檢測(cè)試劑會(huì)因基質(zhì)分解出硝基酚或酚基苯胺而變黃。有些試劑久置后變渾濁。撫生生物這些情況均可使空白吸光度升高。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶等負(fù)反應(yīng)，在放置過(guò)程中其試劑空白吸光度會(huì)因NADH自行氧化為NAD+而下降。
 

　　反應(yīng)中抗Vc干擾問(wèn)題：由于維生素c易氧化，樣品中Vc會(huì)競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)生成的過(guò)氧化氫，而產(chǎn)生負(fù)干擾。上海撫生生物因此，在試劑R1中加入抗壞血酸氧化酶，這種方法是有效的，但不一定有很大的意義。因?yàn)閂c干擾必須同時(shí)具備二個(gè)條件：丙烯葡聚糖凝膠S-200 HR,Sephacryl S-200 High resolutiona)Vc攝入量較多；b)采血后立即測(cè)定。實(shí)驗(yàn)表明離體血清中Vc在90 min后會(huì)全部被氧化。又如，使用胺類新色原。分子共軛結(jié)構(gòu)特性使得靈敏度提高，相應(yīng)可以減少樣本用量，較終能有效地降低干擾物的量.b)使生成胺類色素原較大吸收峰由500~520 nm移至550 nm以上，以避開(kāi)黃疸、溶血干擾。如：亞鐵一H 0 ，能有效避免黃疸干擾的理論依據(jù)是亞鐵與H。0。親和力遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于膽紅素。甘油三酯測(cè)定，有人主張選用雙試劑方法消除內(nèi)源性甘油，這個(gè)方法是可行的，但忽視了一個(gè)化學(xué)平衡理論。因?yàn)樗械孽ピ谒芤褐卸疾皇呛?jiǎn)單地以酯的形式存在，而是以水解與酯化相平衡的形式存在。撫生生物 在一個(gè)平衡體系中，如果去除游離甘油，這個(gè)平衡就向生成甘油方向移動(dòng)，甘油三酯就會(huì)重新水解，生成新的甘油，達(dá)到新的平衡，因此樣品與R1試劑孵育時(shí)間越長(zhǎng)，測(cè)得甘油三酯值就越低。
 

　　甘油三酯測(cè)定，不僅要去除游離甘油，而且還要克服樣本含量真實(shí)性發(fā)生的變化，試劑中必須加入甘油激酶，并且延遲時(shí)間要標(biāo)準(zhǔn)化。所以，一些試驗(yàn)項(xiàng)目在消除內(nèi)源性物質(zhì)干擾的同時(shí)，會(huì)帶來(lái)樣品含量真實(shí)性的變化。