人抗紅細胞抗體,RBCELISA試劑盒
使用說明書elisa法測定

規格：48T/96T

本試劑盒僅供體外研究使用!

ELISA法定量測定人尿液或其它相關生物液體指標的含量。

實驗原理 

用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗指標抗體、HRP標記的親和素，經過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。 

人抗紅細胞抗體,RBCELISA試劑盒 試劑盒組成及試劑配制 

1．試劑盒保存：-20℃（較長時間不用時）；2-8℃（頻繁使用時）。 

2．濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。 

3．中、英文說明書可能會有不一致之處，請以英文說明書為準。 

4．剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質，此為正常現象，不會對實驗結果造成任何影響。 

需要而未提供的試劑和器材 

1. 標準規格酶標儀 

2. 高速離心機 

3. 電熱恒溫培養箱 

4. 干凈的試管和Eppendof管 

5. 系列可調節移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器 

6. 蒸餾水，容量瓶等 

1. 酶聯板（Assay plate ）：一塊（96孔）。 

2. 標準品（Standard）：2瓶。 

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。 

4. 生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。 

5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。 

6. 生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100） 

7. 辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100） 

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。 

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。 

標本的采集及保存  

1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 

2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000 g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 

3. 細胞培養物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 

注：標本溶血會影響zui后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。 

標本的稀釋原則： 

首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內，檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中，應做好詳細的記錄。zui后計算濃度時，稀釋了“N”倍，標本的濃度應再乘以“N”。 

標準品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為50 U/L，做系列倍比稀釋后，分別稀釋50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，1.56 U/L，0.78 U/L，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 U/L，臨用前15分鐘內配制。 

如配制25 U/L標準品：取0.5ml（不要少于0.5ml）50 U/L的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。