產品屬性：

商品介紹：

測定意義

TPX屬于過氧化物酶家族，在體內主要通過還原過氧化氫和一些氫過氧化物來實現抗氧化作用，功能與GPX類似，也是谷胱甘氧化還原循環關鍵酶之一。TPX普遍存在于各種生物體內，酵母、植物、動物、原生動物、寄生蟲甚至細菌和古細菌體內都含有該酶，在進化上高度保守。TPX與細胞增殖、分化、細胞凋亡及腫瘤發生調控密切相關。TPX的主要功能包括細胞脫毒、抗氧化和調節由過氧化氫介導的信號轉導和免疫反應。

測定原理：

TPX催化H2O2氧化二硫蘇糖醇（DTT），H2O2的吸收波長為240nm，通過測定240nm波長處吸光度的下降速率，即可計算出TPX活性。

需自備的儀器和用品：

紫外-可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調節移液器、3ml石英比色皿、雙蒸水
產品內容：

公司產品僅用于科研酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

堿性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 1.5mL×1 支，4℃保存

試劑三：粉劑×1 支，-20℃保存，用時加入 1.6mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；

試劑四：粉劑×1 支，4 ℃保存，用時加入 1.9mL 雙蒸水，混勻，4℃保存一周；

試劑五：液體 0.7mL×1 支，4 ℃保存；

試劑六：液體 10mL×1 瓶，4 ℃保存；

試劑七：自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。

NAD 標準品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標準溶液備用。

NADH 標準品：粉劑×1 支，-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水，即 2umol/mL，將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標準溶液備用。

操作步驟：

一、NAD+和 NADH 的提取：

1、血清（漿）中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：取 0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min；取上清 200uL，加入等體積堿性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清，冰上保存待測。

NADH 的提取：取 0.1mL 血清（漿），加入 0.5mL 堿性提取液，煮沸 5min(蓋緊，以防止水分 散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液；混勻，10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。

2、組織中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：稱取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積堿性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。

NADH 的提取：稱取約 0.1g 組織，加入 0.5mL 堿性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(蓋緊，以防 止水分散失)，冰浴冷卻后，10000g 4℃離心 10min，取上清 200uL，加入等體積酸性提取液混勻， 10000g 4℃離心 10min，取上清,冰上保存待測。

3、細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：收集 500 萬細胞或細菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超聲波破碎 1min（強度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測。

NADH 的提取：收集 500 萬細胞或細菌，加入 0.5mL 堿性提取液，超聲波破碎 1min（強度 20％ 或 200W，超聲 2s，停 1s），煮沸 5min(蓋緊，以防止水分散失)，冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心 10min，取上清液 200uL 另一新的離心管中，加入等體積的酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4℃ 離心 10min，取上清,冰上保存待測。

下列是公司正在熱銷的產品：

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TPX硫氧還蛋白過氧化物酶紫外分光光度法周期后期促進蛋白亞基11抗體Human IVD(Isovaleryl-CoA dehydrogenase) ELISA Kit大鼠抗性磷5b（TRACP-5b）ELISA試劑盒,

腺瘤性結腸息肉病蛋白2抗體Human ITPR1 ELISA Kit大鼠抗促甲狀腺受體抗體（TRAb）ELISA試劑盒,

磷化分裂周期蛋白16抗體Human ISG20 ELISA Kit大鼠心肌營養1（CT-1）ELISA試劑盒,

DNA修復相互作用蛋白抗體Human IVNS1ABP ELISA Kit大鼠脫氧吡酚/脫氧吡啉（DPD）ELISA試劑盒,

脂肪膜相關蛋白抗體Human ISM2 ELISA Kit大鼠骨橋（OPN）ELISA試劑盒,

載脂蛋白A1結合蛋白抗體抗體Human IWS1 ELISA Kit大鼠降鈣基因相關肽（CGRP）ELISA試劑盒,

載脂蛋白B-mRNA編輯復合物1抗體Human ISYNA1 ELISA Kit大鼠S100蛋白（S-100）ELISA試劑盒,

載脂蛋白B-mRNA編輯復合物2抗體Human ISG20L2 ELISA Kit大鼠過氧化物體增殖因子活化受體γ（ PPAR-γ）ELISA試劑盒,

注意事項：

1、操作過程應避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加，必須分開加。

2、反應過程要注意避光。

3、當吸光值大于 1 時，建議稀釋后測量，計算公式中應當乘以稀釋倍數。