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樣品收集:
1. 血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集
血液的試管應為一次性的無熱原,無內毒素試管。
2. 血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂樣品。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細胞培養上清:取細胞培養上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質及細胞碎片。取上清檢測。
5. 其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測
6. 樣品應清澈透明,懸浮物應離心去除。
7. 樣品收集后若在1周內進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內檢測),或-80℃(6個月內檢測),避免反復凍融。
8. 如果您的樣品中檢測物濃度高于標準品值,請根據實際情況,做適當倍數稀釋(建議先做預實驗,以確定稀釋倍數)。
選擇ELISA試劑盒應從靈敏度、特異性、精密度、穩定性、簡便性、安全性及經濟性全面評價。
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:產品僅用于科研用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等本..
產品名稱 | anti-cartilage-Ab人抗軟骨抗體ELISA試劑盒 |
英文名稱 | Humananti-cartilage-antibodyELISAKit |
貨號 | FS-E2526 |
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
甘草酸二銨鹽Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser240/244) (D68F8) XP® Rabbit mAb5-溴-2-羥基-硝基吡啶
橄欖苦苷(標準品)PSA/KLK3 (D6B1) XP®Rabbit mAb2-哌啶甲酸酯
高麗槐素(標準品)PSA/KLK3 (D6B1) XP®Rabbit mAb吡唑
高良姜素(標準品)Anti-rabbit IgG (H+L) (DyLight™ 680 Conjuga)氨基-甲酸
高三尖杉酯(標準品)Anti-rabbit IgG (H+L) (DyLight™ 680 Conjuga)2-金剛烷甲酸
高香草酸(標準品)STAM2 (D8B3G) Rabbit mAb
告達亭苷元Human Oncostatin M (hOSM)吡啶基偕肟
格列風內酯(標準品)Human Oncostatin M (hOSM)4,5-二咪唑
葛根素(標準品)LAP2α (3A3) Mouse mAb氨基-2-氟吡啶
葛根素Mouse Oncostatin M (mOSM)芐基溴
根皮苷(標準品)Mouse Oncostatin M (mOSM)2,6-二-硝基吡啶
根皮苷Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb (Biotinylad)1-(三氟基)哌鹽酸鹽
根皮素(標準品)c-Raf (D4B3J) Rabbit mAb氨基-酚
根皮素Phospho-YAP (Ser109) (E5I9G) Rabbit mAb2-氨基-甲基吡啶
鉤藤(標準品)Phospho-Stat1 (Tyr701) (58D6) Rabbit mAb (Biotinylad)2-氨基-甲基噻唑
β-谷甾p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2,4,6-三吡啶
光甘草定JMJD1B (6A1-1F5) Mouse mAb2,3,5-三吡啶
鬼臼毒素(標準品)JMJD1B (6A1-1F5) Mouse mAb1-氨基芘
anti-cartilage-Ab人抗軟骨抗體ELISA試劑盒紫紅曲Penicillin G 青霉素G抗體100 ul
靈芝(赤芝,紅靈芝)8-OHdG 8-羥基脫氧鳥苷抗體100 ug
乳明串珠菌RYBP/APAP1/CD337 凋亡相關蛋白1抗體100 ug
乳酸類芽孢桿菌Nkx2.5/Cardiac-specific homeobox 1 心臟特異性同源盒轉錄因子NKX2.5抗體100 ug
赭色擲孢酵母ADORA1 腺苷A1A受體抗體100 ug
刺囊毛霉AMP deaminase 1 腺苷單磷酸脫氨酶1抗體100 ul
休哈塔假絲酵母休哈塔亞種A2AR/Adenosine A2a receptor 腺苷A2A受體抗體100 ug
棘孢木霉AACT-Alpha1/A1ACT α-1抗胰糜蛋白酶抗體1Kit
長枝木霉AAK1 AP2關聯激酶1抗體100 ug
赤散囊菌Cyp2-j3 細胞色素P450Ⅱj3抗體100 ug
赭曲霉OST-beta 有機溶質轉運蛋白OSTβ抗體1 Kit
棒束青霉AANAT 芳香胺N-乙酰化轉移酶抗體100 ul
鮮綠青霉AT2R2 血管緊張素Ⅱ受體2抗體100 ug
膨端青霉Influenza A virus (Duck) 鴨流感病毒抗體100 ug
粟酒裂殖酵母TNF-alpha 腫瘤壞死因子-α抗體100 ug
降酮短桿菌AARS2 丙氨酰tRNA合成酶2抗體100 ul
格氏李斯特氏菌TDRD9/HIG1 缺氧誘導蛋白HIG1抗體100 ug
布雷正青霉SIRT1/sirtuin 1 沉默調節蛋白1抗體100 ul
注意事項:
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.產品僅用于科研嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
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