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當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>輔酶Ⅱ系列>> ICDHc胞漿異檸檬酸脫氫酶紫外分光光度法

ICDHc胞漿異檸檬酸脫氫酶紫外分光光度法

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-03-14 10:28:30瀏覽次數(shù):521次

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貨號 FS-01S63245
ICDHc胞漿異檸檬酸脫氫酶紫外分光光度法的熱銷的產(chǎn)品:絲衣霉屬細胞去甲基化處理試劑盒
5-羥基馬鞭草苷CAS:50816-24-5基因組DNA體外*甲基化(sss1)處理試劑盒
三七皂苷R1CAS:80418-24-2GMS10甲基化基因轉(zhuǎn)化感受態(tài)細菌
137-40-6丙酸鈉GMS10甲基化基因鈣轉(zhuǎn)感受態(tài)細菌

商品介紹:

ICDHc(EC 1.1.1.42)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,催化異檸檬酸脫氫脫羧生成 α-酮戊二酸,同時還原NADP+生成NADPH。ICDHc是細胞質(zhì)中除了磷酸戊糖途徑外又一種NADPH重要來源,在逆境中該酶活性通常會發(fā)生顯著變化。

測定原理:

利用ICDHc催化NADP+還原成NADPH反應(yīng),在340 nm下測定NADPH濃度的增加。

所需的儀器和用品:

紫外分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

貨號

ICDHc胞漿異檸檬酸脫氫酶紫外分光光度法

紫外分光光度法

50管/48樣

FS-01S63245

產(chǎn)品內(nèi)容:

酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;

堿性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 1.5mL×1 支,4℃保存

試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時加入 1.6mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;

試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時加入 1.9mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;

試劑五:液體 0.7mL×1 支,4 ℃保存;

試劑六:液體 10mL×1 瓶,4 ℃保存;

試劑七:自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。

NAD 標準品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標準溶液備用。

NADH 標準品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標準溶液備用。

 

11.png 

操作步驟:

一、NAD+和 NADH 的提取:

1、血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提取:

NAD+的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min;取上清 200uL,加入等體積堿性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。

NADH 的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 堿性提取液,煮沸 5min(蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。

2、組織中 NAD+和 NADH 的提取:

NAD+的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積堿性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。

NADH 的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 堿性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。

3、細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提取:

NAD+的提取:收集 500 萬細胞或細菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。

NADH 的提取:收集 500 萬細胞或細菌,加入 0.5mL 堿性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。

注意事項:

1、公司產(chǎn)品僅用于科研操作過程應(yīng)避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加,必須分開加。

2、反應(yīng)過程要注意避光。

3、當吸光值大于 1 時,建議稀釋后測量,計算公式中應(yīng)當乘以稀釋倍數(shù)。

下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)酶聯(lián)免疫試劑盒弗雷德里克斯堡假單胞Rap1B (36E1) Rabbit mAb

小鼠白介素1α(IL-1α)酶聯(lián)免疫試劑盒枯草芽胞桿AE1/SLC4A1 (D3X1R) Rabbit mAb

小鼠白介素1β(IL-1β)酶聯(lián)免疫試劑盒芽胞桿Phospho-SirT1 (Ser27) Antibody

小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1ra)酶聯(lián)免疫試劑盒 穴形節(jié)皮PAR-4 Antibody

小鼠瘦素(LEP)酶聯(lián)免疫試劑盒植物乳桿Merlin/Ezrin/Radixin/Moesin (D1P8I) Rabbit mAb

小鼠白血病抑制因子(LIF)酶聯(lián)免疫試劑盒盤孢屬Phospho-PAR-4 (Thr163) Antibody

小鼠白介素2(IL-2)酶聯(lián)免疫試劑盒冠突曲霉Raf Family Antibody Sampler Kit

小鼠白介素4(IL-4)酶聯(lián)免疫試劑盒沙生梭孢殼Phospho-eEF2 (Thr56) Antibody

小鼠白介素6(IL-6)酶聯(lián)免疫試劑盒葡萄汁有孢漢遜酵母FGF Receptor 2 (D4L2V) Rabbit mAb

小鼠白介素24(IL-24)酶聯(lián)免疫試劑盒牛舌、肝色牛排eEF2 Antibody

小鼠白介素10(IL-10)酶聯(lián)免疫試劑盒白地霉Progesterone Receptor A/B (D8Q2J) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)

小鼠白介素17(IL-17)酶聯(lián)免疫試劑盒棒桿Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)

小鼠γ干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)免疫試劑盒黃桿Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)

小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯(lián)免疫試劑盒 腸炎沙門氏Phospho-MEK1/2 (Ser221) (166F8) Rabbit mAb

小鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)酶聯(lián)免疫試劑盒 栗疫Phospho-MEK1/2 (Ser221) (166F8) Rabbit mAb
ICDHc胞漿異檸檬酸脫氫酶紫外分光光度法轉(zhuǎn)化因子樣蛋白4抗體Human ONECUT1 ELISA Kit仙人掌

NADH復(fù)合體5抗體Human OPA3 ELISA Kit鹽

肌微管素1抗體Human OPTN ELISA KitL-絲

髓性白血病蛋白1抗體Human OFD1 ELISA KitN-乙酰-L-半酸

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體Human OGT ELISA KitL-甘-甘-纈三肽

組織相容性復(fù)合體2抗體Human OIP5 ELISA Kit馬尿酸-L-苯丙

磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體Human OLFM1(Olfactomedin-1) ELISA Kit2′-脫氧鳥苷-5′-三磷酸三鈉鹽

甲基化CpG結(jié)合蛋白2抗體Human OL ELISA Kit2-萘-1-磺酸


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