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當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>輔酶Ⅱ系列>> ICDHc胞漿異檸檬酸脫氫酶紫外分光光度法
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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2022-03-14 10:28:30瀏覽次數(shù):521次
聯(lián)系我時,請告知來自 智慧城市網(wǎng)貨號 | FS-01S63245 |
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商品介紹:
ICDHc(EC 1.1.1.42)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,催化異檸檬酸脫氫脫羧生成 α-酮戊二酸,同時還原NADP+生成NADPH。ICDHc是細胞質(zhì)中除了磷酸戊糖途徑外又一種NADPH重要來源,在逆境中該酶活性通常會發(fā)生顯著變化。
測定原理:
利用ICDHc催化NADP+還原成NADPH反應(yīng),在340 nm下測定NADPH濃度的增加。
所需的儀器和用品:
紫外分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
ICDHc胞漿異檸檬酸脫氫酶紫外分光光度法 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | FS-01S63245 |
產(chǎn)品內(nèi)容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
堿性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 1.5mL×1 支,4℃保存
試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存,用時加入 1.6mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑四:粉劑×1 支,4 ℃保存,用時加入 1.9mL 雙蒸水,混勻,4℃保存一周;
試劑五:液體 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
試劑六:液體 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
試劑七:自備。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸餾水充分混合備用。
NAD 標準品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.5mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NAD 標準溶液備用。
NADH 標準品:粉劑×1 支,-20℃保存。臨用前加入 1.4mL 蒸餾水,即 2umol/mL,將其稀釋為 1.25nmol/mL 的 NADH 標準溶液備用。
操作步驟:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(漿)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min;取上清 200uL,加入等體積堿性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.5mL 堿性提取液,煮沸 5min(蓋緊,以防止水分 散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液;混勻,10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
2、組織中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積堿性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:稱取約 0.1g 組織,加入 0.5mL 堿性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(蓋緊,以防 止水分散失),冰浴冷卻后,10000g 4℃離心 10min,取上清 200uL,加入等體積酸性提取液混勻, 10000g 4℃離心 10min,取上清,冰上保存待測。
3、細胞或細菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 萬細胞或細菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
NADH 的提取:收集 500 萬細胞或細菌,加入 0.5mL 堿性提取液,超聲波破碎 1min(強度 20% 或 200W,超聲 2s,停 1s),煮沸 5min(蓋緊,以防止水分散失),冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心 10min,取上清液 200uL 另一新的離心管中,加入等體積的酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4℃ 離心 10min,取上清,冰上保存待測。
注意事項:
1、公司產(chǎn)品僅用于科研操作過程應(yīng)避光。不可將試劑一、二、三和四混合后再加,必須分開加。
2、反應(yīng)過程要注意避光。
3、當吸光值大于 1 時,建議稀釋后測量,計算公式中應(yīng)當乘以稀釋倍數(shù)。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)酶聯(lián)免疫試劑盒弗雷德里克斯堡假單胞Rap1B (36E1) Rabbit mAb
小鼠白介素1α(IL-1α)酶聯(lián)免疫試劑盒枯草芽胞桿AE1/SLC4A1 (D3X1R) Rabbit mAb
小鼠白介素1β(IL-1β)酶聯(lián)免疫試劑盒芽胞桿Phospho-SirT1 (Ser27) Antibody
小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1ra)酶聯(lián)免疫試劑盒 穴形節(jié)皮PAR-4 Antibody
小鼠瘦素(LEP)酶聯(lián)免疫試劑盒植物乳桿Merlin/Ezrin/Radixin/Moesin (D1P8I) Rabbit mAb
小鼠白血病抑制因子(LIF)酶聯(lián)免疫試劑盒盤孢屬Phospho-PAR-4 (Thr163) Antibody
小鼠白介素2(IL-2)酶聯(lián)免疫試劑盒冠突曲霉Raf Family Antibody Sampler Kit
小鼠白介素4(IL-4)酶聯(lián)免疫試劑盒沙生梭孢殼Phospho-eEF2 (Thr56) Antibody
小鼠白介素6(IL-6)酶聯(lián)免疫試劑盒葡萄汁有孢漢遜酵母FGF Receptor 2 (D4L2V) Rabbit mAb
小鼠白介素24(IL-24)酶聯(lián)免疫試劑盒牛舌、肝色牛排eEF2 Antibody
小鼠白介素10(IL-10)酶聯(lián)免疫試劑盒白地霉Progesterone Receptor A/B (D8Q2J) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
小鼠白介素17(IL-17)酶聯(lián)免疫試劑盒棒桿Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)
小鼠γ干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)免疫試劑盒黃桿Phospho-Akt (Ser473) (193H12) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯(lián)免疫試劑盒 腸炎沙門氏Phospho-MEK1/2 (Ser221) (166F8) Rabbit mAb
小鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)酶聯(lián)免疫試劑盒 栗疫Phospho-MEK1/2 (Ser221) (166F8) Rabbit mAb
ICDHc胞漿異檸檬酸脫氫酶紫外分光光度法轉(zhuǎn)化因子樣蛋白4抗體Human ONECUT1 ELISA Kit仙人掌
NADH復(fù)合體5抗體Human OPA3 ELISA Kit鹽
肌微管素1抗體Human OPTN ELISA KitL-絲
髓性白血病蛋白1抗體Human OFD1 ELISA KitN-乙酰-L-半酸
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體Human OGT ELISA KitL-甘-甘-纈三肽
組織相容性復(fù)合體2抗體Human OIP5 ELISA Kit馬尿酸-L-苯丙
磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體Human OLFM1(Olfactomedin-1) ELISA Kit2′-脫氧鳥苷-5′-三磷酸三鈉鹽
甲基化CpG結(jié)合蛋白2抗體Human OL ELISA Kit2-萘-1-磺酸
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