細胞基本屬性：

細胞簡介：小鼠海馬神經元細胞分離自海馬體；海馬體(Hippocampus)，又名海馬回、海馬區、大腦海馬，海馬體主要負責記憶和學習。海馬神經元細胞是海馬區的主要細胞組成，主要功能是參與近期記憶、情緒及內臟功能調節、是老年性癡呆、癲癇等疾病的主要病灶之一。海馬屬于大腦的邊緣系統，在學習、記憶、情緒反應及神經系統疾病的病理生理變化等方面有重要作用，而且海馬組織是中樞神經系統內主要的神經干細胞聚集區，具有高度序化板層結構和神經元相對獨立分布的特點，境界相對清晰，便于取材，因此，海馬神經元體外培養模型被廣大基礎醫學和臨床醫學研究者當做理想的實驗模型。海馬神經元細胞培養是研究神經細胞生物學特性和外源干擾因素作用(細胞因子)的有效細胞模型，其在神經生物學，發育生物學體外實驗研究中已被廣泛應用。

培養基：含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

包被條件：PLL(0.1mg/ml)

換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：0.25%胰dan白酶

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

傳代比例：1:2

注意事項：

1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

原代細胞培養方法：

1.準備：取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2.布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3.處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。

4.剪切：用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊，以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液，然后一并倒入三角燒瓶中，結扎瓶口或塞以膠塞。

5.消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6.分離：在消化過程中見消化液發混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500~1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養液。

7.計數：用計數板計數，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養液調整后，分裝入培養瓶中。對大多數細胞來說，pH要求在7.2~7.4范圍，培養液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調整。

8.培養：置于36.5℃溫箱培養，如用CO2溫箱培養，瓶蓋需擰松半圈。

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