人膀胱上皮細胞

細胞簡介：膀胱是一個儲尿器官,它是由平滑肌組成的一個囊形結構，  位于骨盆內，  其后端開 口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌，可以控制尿液的排出。  膀胱壁分 為三層：即漿膜層、肌肉層和粘膜層。膀胱上皮細胞主要出于粘膜層，  是極薄的 一層移行上皮組織，  和輸尿管及尿道粘膜彼此連貫。粘膜在三角區(qū)由于緊密地和 下層肌肉連合，  所以非常光滑，  但在其他區(qū)域則具有顯著的皺襞，  在膀胱充盈時 ，皺襞即消失。粘膜層有腺組織，特別是在膀胱頸部及三角區(qū)。  由于尿路移形上 皮會脫落，  隨尿液一起排出，因此獲取相對比較容易，是泌尿組織工程的種子細 胞

培養(yǎng)基：原代角質形成細胞培養(yǎng)體系D

換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：  空氣，95%；CO2 ，5%

細胞基本屬性：

原代細胞培養(yǎng)方法：

1.準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2.布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3.處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。

4.剪切：用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊，以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液，然后一并倒入三角燒瓶中，結扎瓶口或塞以膠塞。

5.消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6.分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500~1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7.計數：用計數板計數，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數細胞來說，pH要求在7.2~7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調整。

8.培養(yǎng)：置于36.5℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶蓋需擰松半圈。

公司正在出售的產品：

注意事項：

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。